KingFisher全自动磁珠纯化系统

使用KingFisher磁珠纯化系统提高基因组学和蛋白组学研究的通量

KingFisher 家族－快速纯化蛋白、核酸和细胞

Thermo Electron公司生产的令人振奋的KingFisher 产品系列包括了令人激动的DNA/RNA和蛋白纯化系统，解决客户现在和未来的所有纯化问题。基于创新的的的磁性分离技术，KingFisher 系统可让你处理任何样品-蛋白、核酸和细胞-从各种来源如全血、细胞培养液、组织裂解液、土壤、排泄物中。样品的完整性，真正令人惊异的速度，在15分钟内纯化96个样品。

KingFisher 纯化系统可提供：

l         快速全自动纯化

l         高通量96个样品的同步处理

l         可纯化任何来源的样品

l         预设的或用户自定义的程序

l         操作简单，可通过单机或外接电脑操作

KingFisher 产品系列包括了三个系统-KingFisher,KingFisher ml和KingFisher 96,覆盖了20-1000ul的样品量，每个系统都由主机、特别设计的塑料耗材和软件组成。如已有优化的程序，你可以在十几分钟内结束运行。

l         KingFisher：20-200ul的样品放在微孔板中，一次可处理24个样品

l         KingFisher ml：50-1000ul的样品放在样品管中，一次可处理15个样品

l         KingFisher 96：20-1000ul样品放在深孔板，微孔板和PCR板中，*多一次可处理96个样品

可解决以下的纯化问题

速度和样品纯度一直是基因组学和蛋白组学研究者所关注的问题。在基因组和蛋白图谱研究中的大工作量意味着速度是必需的。同样，即使是*有经验的分析者，由于起始样品质量很差，而得到不令人满意结果的情况也越来越多。越来越多不同种类的被纯化样品，从稀有细胞类型和mRNA，到非常大和精巧的蛋白复合体，体现了真正的挑战。在所有这些方面，KingFisher 自动化纯化系统都能确保纯化所需样品，去除杂质。

以无可比拟的速度工作

KingFisher 系统的处理速度在市场上是无可比拟的，这来源于的磁珠处理技术。在不同的纯化阶段-结合、混合、清洗和洗脱中用磁棒转移样品颗粒，消除了液体处理过程，并提高自动化程度，使之成为一种和强劲的技术。整体的效率带来了速度－此系列中*的KingFisher 96可在15－30min内纯化96个样品，这是真正引领市场的高通量仪器。

同样重要的是，通过自动化纯化处理技术，样品的交叉污染和试剂的挂带被消除。

用于你自己日常的实验

KingFisher 可以让你增加工作的灵活性，预设的程序可用于很多已有的磁珠方法，另外通过使用直观的KF软件，可以很简单地编辑已有的程序和创建的程序。程序可以通过仪器或电脑直接运行。

在实验产出方面直接受益

安装一台KingFisher 可以立即对你的工作产生直接的影响：你可以用以前从未想过的速度来纯化样品；可以将手工操作的需要*小化，而用自动化将之取代；可以使你更多地集中于下游的分析。

KingFisher

KingFisher 主要用于小规模样品的纯化，所有纯化和处理步骤都可在微孔板中进行，仅需简单的按键既可进行操作。

KingFisher ml

KingFisher ml是处理大样品量时的选择，可以在一条五连管中进行所有的纯化和处理步骤。可以把纯化的目标分子洗脱到低至50ul的溶液中，因此可将细胞和蛋白从更大体积的起始样品中同时进行分离和浓缩。

KingFisher 96

使用96孔板的形式，KingFisher 96提供*简单和快速的方法，从各种样品材料中纯化基因组DNA或RNA及蛋白。可提供预设的程序，也可以创建用户自己的程序，用于一些特殊的应用。

KingFisher 塑料耗材

KingFisher 仪器使用由聚丙烯制成的一次性的塑料耗材。这种塑料经过特别设计用于处理和分离目标分子，由于其低的生物分子结合性，用于处理磁珠是*理想的。KingFisher ml在条管中处理样品，KingFisher 和KingFisher 96在特别设计的微孔板中处理样品。磁棒由一次性的塑料磁套来保护。这些塑料耗材的设计可以确保磁珠的回收率。

经过特殊设计并用于KingFisher 96的深孔板，可确保处理和混匀磁珠。分离的DNA/RNA的得率和纯度在使用这些新设计的深孔板后，得到了显著的提高（如图1）。

l         对于有机溶剂的高耐受性

l         极端温度的耐受性（-196-121）

l         可用粘性封口膜密封

l         可使用盖垫密封

KingFisher 软件－出类拔萃系统的配合

KingFisher 软件主要用于开发用户自定义的程序，提高灵活性。

KingFisher 应用

快速纯化蛋白，即使是*脆弱的蛋白复合体

KingFisher 可用于纯化各种蛋白，从重组蛋白到治疗用抗体。系统的磁珠分离技术可确保*精巧的蛋白复合体也可以完整无缺的被分离。

由于其高度复杂的结构和多变的生物化学特性，重组蛋白至今仍被认为难以使用标准化程序进行纯化。KingFisher 解决了这个问题，可使用各种宿主细胞-动物细胞、昆虫、酵母、细菌或转基因组动物/植物，常规地纯化抗体/抗原、药物和疫苗。

KingFisher也可通过全自动的5轮生物处理-孵育/结合，清洗和洗脱，显著提高噬菌体展示实验的效率。KingFisher 技术和基于磁珠的色谱分离技术，可让你以一种简单、强劲和可重复的方式每天处理纯化上百的样品，可进行血浆中肽段标记物的高通量鉴定，而不需要离心或过柱。独特的KingFisher技术和广泛应用范围的色谱分离磁珠可支持各种蛋白组学的应用。

KingFisher 软件也可让你开发自己的程序应用于其他的蛋白组学研究，蛋白相互作用研究，蛋白磷酸化研究，糖蛋白纯化和蛋白质芯片。

基因组学

应用于DNA/RNA研究的起始材料的范围是极广的，从用于常规检测的全血和尿液到法医需要的指甲、毛发和烟嘴。KingFisher 可使你从所有的这些样品中，成功纯化出足够数量的DNA/RNA。

与KingFisher 系列产品配合使用的纯化试剂盒

基于磁珠的试剂盒与KingFisher、KingFisher ml或KingFisher 96一起使用，用于纯化DNA和RNA效果。更值得肯定的是，在各种植物组织中的核酸得率都非常好。植物DNA试剂盒与KingFisher ml和KingFisher 96一起使用，可从不同植物的物种和来源如叶片和种子中纯化DNA。使用基于磁珠的分离技术也可确保DNA/RNA无蛋白和核酸酶的污染，这意味着你可以直接将其用于下游的应用。

建议选择的磁珠纯化试剂盒生产商

1.TANBead,来自台湾的专业磁珠制造商,专长于从全血,细胞,动物组织,植物组织中提取DNA和RNA,适合常规科研应用，性价比极高。一般可从100ul全血中提取2-4ug的DNA,如图1。

 M     1    2    3    4    5    6    M

图1 TANBead® blood DNA Auto kit
Repeatibility Test

M: 1 kb maker                           

Lane 1: TANBead-TEST 1

Lane 2: TANBead-TEST 2

Lane 3: TANBead-TEST 3

Lane 4: TANBead-TEST 4

Lane 5: TANBead-TEST 5

Lane 6: TANBead-TEST 6

2.Invitrogen(原Dynal)，全球知名的磁珠试剂盒供应商，产品种类非常广，特别是在蛋白纯化领域（His-tag 组氨酸标记的重组蛋白、各类非特异性多肽）,细胞纯化领域（纯化CD34,T细胞CD3,CD4等）及细菌免疫磁性分离技术领域（如大肠杆菌O157等）处于地位。

3. Ambion,主要专注于病毒RNA纯化，现已被ABI收购。该公司可提供应用于禽流感病毒RNA纯化的试剂盒，是目前通过FDA认证的禽流感病毒RNA纯化试剂盒。纯化后，还可以用ABI的RT-PCR禽流感试剂盒进行定量分析，可用于食品检验、兽医检验及CDC。

4. 其他部分试剂盒供应商信息，如chemogen,该公司可提供从细菌和食物中提取DNA的试剂盒。Invitek,是一家德国公司，在从法医物证和口腔棉签棒中提取DNA 方面很有特色。

上海科华，国内很少的有能力自主研发磁珠试剂盒的公司，使用我们的Kingfisher 96进行研发，向市场推出了临床检验中HIV/HBV/HCV病毒核酸纯化的试剂盒。

技术指标

                    KingFisher 96          KingFisher ml      KingFisher

处理量              20-1000ul             50-1000ul          20-200ul  

样品量/一次运行      96                   15                24    

磁珠回收效率         >=95%               >=95%            >=99%  

磁头                 96                  15                 24

板的类型           深孔板（50-1000ul）    特制管条，5连管   特制微孔条，1×8孔 

                   KingFisher 96板        形式，1000ul       8×12格式 100&200ul

                   （20-200ul）           管                每孔加样量

                   PCR板（20-100ul）   

磁头套          特别设计，96孔形式     特别设计，5连管形式  特别设计1×12 形式   

加热温度        环境温度以上4度到96度  无加热功能         无加热功能 

磁珠大小        100nm-10um                 100nm-10um         100nm-10um         

按键/显示屏     START/STOP/4个箭头     START/STOP/2个箭头  START/STOP/2个箭头按键/液晶显示屏         按键/液晶显示屏        按键/液晶显示屏

内部软件        *多100个内置程序       *多8个内置程序     *多8个内置程序

KingFisher 软件  可以                     可以                  可以

兼容性

计算机界面      RS-232接口                RS-232接口        RS-232接口

机械臂兼容性    可以                       可以              可以

大小（长×宽×高mm）680×600×380       290×290×31       290×290×31

重量（Kg）       28                       10                 10

KingFisher 软件技术参数：

支持的操作系统      Microsoft Windows 2000 带SP4或XP专业版带SP2,IE6.0必须安装

用途                 创建、修改和运行程序

KingFisher 定购信息

5400000   KingFisher 磁珠处理器，100-240v,50/60Hz(用微孔板)

5400050   KingFisher ml,磁珠处理器，100-240v,50/60Hz

5400500   KingFisher 96磁珠处理器，100-240v,50/60Hz(包含深孔板磁头)

24073410  KingFisher 96 PCR板磁头

24073420  KingFisher 96 普通板磁头

24073430  KingFisher 96深孔板磁头

附件和备件

11273100   KingFisher ml 管架托盘

24073180   KingFisher ml 微管托盘

KingFisher 耗材

97002070   KingFisher 磁头套，50个/盒

97002080   KingFisher 板 100ul,50个/盒

97002084   KingFisher 板 200ul,50个/盒

97002090   KingFisher 耗材组合，8块100ul板＋8个磁头套/盒

97002094   KingFisher 耗材组合，8块200ul板＋8个磁头套/盒

KingFisher ml耗材

97002111    KingFisher ml 磁头套，800个

97002121    KingFisher ml 管，900个（20×45个）

97002131    KingFisher ml耗材组合，管和磁头套可用于60个样品

97002141    KingFisher ml耗材组合，管和磁头套可用于240个样品

KingFisher 96耗材

97002514    PCR磁头的磁头套，8×10个/盒

97002524    KF磁头的磁头套，10×10个/盒

97002534    深孔板磁头的磁头套，10×10个/盒

97002540   KingFisher 96板（200ul）,48块板/盒

95040450   96孔深孔板，V形底，聚丙烯材料，50个/盒

95040460   96孔深孔板，V形底，无菌，聚丙烯材料，50个/盒

9503230    深孔板盖，50个/盒

9503233    深孔板盖，无菌，25个/盒

Figure 1.使用Thermo 深孔板和其他厂家二种板的总RNA平均得率和标准差的比较（从1000000个细胞中纯化），使用Agilent Bioanalyzer 2100进行分析。

部分试剂盒厂商的联系方式

Invitrogen 北京办联系信息如下：

地址: 北京市经济技术开发区荣昌东街7号，隆盛工业园203

邮编：100176

技术专线：010-67805135

公司电话：010-67806708

传真：010-67806535

网址：www.invitrogen.com.cn

TANBead 联系信息如下：

公司名称：台湾图点纳米技术开发有限公司

地址：台湾桃园县卢竹乡南坎路二段57号5楼

网址：www.tanbead.com

联系人：简建兴