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β-半乳糖苷酶比色检测试剂盒
点击次数:472发布时间:2013/4/25 19:51:23
更新日期:2024/8/15 17:15:41
所 在 地:美洲
产品型号:
优质供应
详细内容
工具包组件
猫。号 | 样品瓶 | 试剂 | 数量 | 存储 |
8068a | 1 | 染色溶液A | 1毫升 | 4°C |
8068b | 1 | 染色溶液B | 1毫升 | 4°C |
8068c | 1 | 染色溶液C | 0.2毫升 | 4°C |
8068d | 1 | 染色溶液D | 20毫升 | 4°C |
8068e | 1 | X-Gal的解决方案 | 5毫升 | -20°C |
8068f | 1 | 100X修复解决方案 | 1毫升 | 4°C |
质量控制
人类脐静脉内皮细胞(HUVEC)与Promega公司rhoSV-BATA-半乳糖苷酶对照载体转染。应用β-半乳糖苷酶比色试验测定24小时后转染基因的表达,如在图1中示出。
步骤
A。试剂的制备
1。准备工作固定的解决方案:准备工作固定溶液稀释100×定影液股票1:100 PBS
2。工作染色溶液的制备:准备新鲜的工作染色样品的数量进行评估的基础上的解决方案。对于每个样本35毫米的钢板,准备以下混合物:
X-gal的解决方案
20微升的染色溶液A
20微升染色溶液B
4微升染色液
染色溶液D
1456微升去离子水Ç 400微升100微升
总计2000年微升工作染色液
B.染色协议
1。从细胞中取出培养基,用PBS冲洗细胞两次
。修复细胞培养用2毫升的工作定影溶液在室温下3-5分钟。
吸定影溶液和冲洗固定的细胞用PBS三次。
4。加入2毫升的工作染色液细胞孵育过夜在37°C,蓝色的颜色应制定β-半乳糖苷酶的表达。
5。删除工作染色溶液和冲洗细胞两次,用PBS,存储细胞在PBS中于4℃直至在光学显微镜下检查。