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技术文章

Bouins波恩氏固定液操作流程是这样的

点击次数:17404 发布时间:2022/10/20 11:19:39

Bouins波恩氏固定液操作流程是这样的

【产品概述】
固定的目的在于保存细胞和组织的原有形态结构,固定剂能阻止内源性溶酶体酶对自身组织和细胞的自溶、抑制细菌和霉菌的生长。固定剂通过凝固、生成添加化合物等使蛋白质内部结构发生改变,从而使酶失活。固定液主要分为醛类固定液、汞类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液、苦味酸盐类固定液等,较常用的是醛类中的福尔马林、醇类中的乙醇。
 
波恩氏固定液固定均匀,组织收缩轻微,对细胞的微细结构显示的很清晰,为一种良好的固定液。尤其对Masson三色法等的结缔组织和肌纤维染色有媒染作用,经其固定后的组织着色鲜艳。该固定液也可能软化皮肤和肌腱,以利于切片。
 
【用途】
活检标本的固定、媒染剂、适用于脂肪较多的组织标本。浮游生物及其他生物组织的固定,用于保存和观察。
 
【产品优点】
用波恩氏溶液固定藻类的优点是细胞变化小,有利于种的鉴定和观察,特别对固定浮游藻类的效果较佳。
 
【使用方法】
1、一般仅需固定30~60min。如果组织块大,可适当延长固定时间,但不宜超过24h。
2、用Bouin's固定液固定后,组织可稍微流水冲洗或不冲洗直接转入70%的乙醇脱水,经乙醇脱水时可除去大部分PA,组织留有一点黄色,对染色也无影响。
 
【注意事项】
1、Bouin's固定液对人体有一定的损害,请在通风好的环境下小心操作,避免吸入。
2、组织取材的厚度不同,固定时间也不同,对组织恰当的选材有利于固定液的渗透。常规活检组织比较适合的厚度为2~4mm,一般不超过6mm。
3、固定液的容量应足够,一般固定液与组织块的体积比率应大于10:1。如果容积不够大,可以在固定期间更换1~3次固定液。
4、温度对固定的影响很明显,提高温度可以加速固定作用,但温度不宜过高。
5、取出新鲜组织后,应及时固定,无法及时固定时,应保存于生理盐水中及时送检。
 
骨穿标本固定及脱钙操作流程
1. 骨髓标本取出后,立即 Bouin 氏固定液固定,固定过夜。
2. 标本从固定液取出以后,放入 EDTA 脱钙液,脱钙液体积 5 倍于骨穿标本,脱钙
4-5 小时。
3. 脱钙后,流水冲洗 15 分钟,包好后,常规脱水、制片。可以保证得到满意的免疫组化
 
实验结果。
注:骨髓标本 Bouin 氏固定液固定的优点,HE 染色后,易于区分原红和原粒
原红:核均匀致密,苏木素染核,染色较深。
原粒:核不均匀,呈大小不一颗粒状,核染色相对较淡。

Bouins波恩氏固定液操作流程是这样的

原创作者:上海信帆生物科技有限公司

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