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骨质疏松模型中铁调素(Hepcidin)变化的相关研究

点击次数:17518 发布时间:2013/9/12 10:31:21

  观察维甲酸灌胃建立制作的大鼠骨质疏松模型;在模型建立过程中选定不同时间点,观察大鼠肝脏的铁调素(Hepcidin)基因表达变化以及相应时刻血清中铁调素含量的观察;在骨质疏松研究领域,观察、研究“铁代谢调节因素(铁调素)”在“骨代谢异常(骨质疏松)”过程中的作用,为进一步研究骨质疏松症的机理、治疗、转归提供新的思路、新的策略。方法:选择3月龄清洁级雄性SD大鼠,分成模型组和对照组;模型组用维甲酸(70mg/kg/d)每天灌胃,对照组用等量的灭菌蒸馏水灌胃,连续14天。灌胃第5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、14天分别处死大鼠取材:血清、肝脏组织、骨组织(胫骨、股骨、腰椎)。获取骨质疏松模型建立指标:灌胃前后大鼠活体骨密度测定、脱钙骨切片分析、血清钙、磷、碱性磷酸酶(ALP);获取肝脏相关研究结果:肝组织切片观察、血清肝功能酶(ALT、AST、γ-GT)测定;采用RT-PCR方法分别观察灌胃5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、14天大鼠肝脏组织铁调素基因表达水平;采用elisa试剂盒测定相应时间的血清中铁调素的含量。结果:实验第14天,模型组与对照组相比,模型组大鼠骨质疏松模型建立成功:骨密度(胫骨、股骨、腰椎)不同程度的降低、骨HE切片中骨小梁稀松、皮质骨变薄、软骨细胞层减少等病理变化。模型建立过程中,与对照组比较,模型组所运用的维甲酸累积计量、累计时间未在肝脏组织HE切片发现明显病理改变、血清肝功能酶含量没有肝脏功能的损伤表现。在实验周期内,模型组与对照组比较,肝脏铁调素基因表达在维甲酸灌胃的不同时间,存在明显差异:早期5、6、7天铁调素基因相对表达量逐渐下降,在第8、9、10天达到较低值,随后有回升,呈现凹陷的抛物线变化趋势;而对照组基本处于水平的轻微波动变化。血清铁调素ELISA检测含量趋势与对照组比较,呈现凹陷的抛物线变化,低值出现在第8、9、10天,整体变化趋势与肝脏基因水平相符合;对照组变化亦与肝脏hepcidin基因水平相符合。结论:根据本次实验结果,对骨质疏松的病因病理的认识及铁代谢与铁调素、骨代谢与铁代谢关系、铁离子与钙离子的关系系列研究的回顾,经分析得出如下结论:1、本研究骨质疏松模型采用单一人工干预方法,没有其他影响因素;实验结束时大鼠骨密度、骨组织学检查表明骨质疏松形成,同时肝脏功能酶和HE切片显示肝脏功能未受药源性产生明显损伤性影响;因此,同期不同时间组大鼠肝脏铁调素基因表达、血清铁调素含量可以代表体内铁代谢不同时间的变化。2、在本研究中,模型组与对照组研究结果的差异表明:铁调素基因RT-PCR变化、血清铁调素ELISA测定含量变化与维甲酸制作的大鼠骨质疏松模型形成有实验相关性。3、在本研究平台下,形成了一个互相影响的假设图:铁调素(Hepcidin)←→铁代谢←→铁离子←→钙离子骨质疏松。

原创作者:上海信帆生物科技有限公司

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