膜蛋白对许多细胞功能而言至关重要，如信号转导、物质运输和细胞间通讯。膜蛋白和受体也是制药行业中研究*多的一类药物靶点。目前约2/3的治疗分子靶定一个或多个膜蛋白。大家都知道，膜蛋白的晶体结构能帮助阐明其功能，并发现其与药物分子相互作用的机制。然而，尽管膜蛋白在细胞蛋白质组中的丰度很高（20-30%），但迄今为止仅有0.1%的晶体结构被确定。

瓶颈在哪里？缺乏提取试剂和方案，无法从各种细胞类型中获得足够量的膜蛋白用于结晶。目前从真核细胞系和组织中提取膜蛋白的策略有很多，包括亚细胞分步分离（蔗糖密度梯度离心）、Triton™ X-114去污剂法、高盐或高pH缓冲液等。但大部分方法都费时费力，并且需要昂贵的超速离心设备。

赛默飞世尔旗下Pierce之前推出的Mem-PER试剂盒也是基于Triton™ X-114，但操作较繁琐，且提取出的疏水片段需要进一步处理，才能用于下游操作。为此，Pierce*近推出新一代的膜蛋白提取试剂盒——Mem-PER Plus试剂盒。它能简单高效地富集内在膜蛋白和膜相关蛋白，且只需要一台小型离心机。

内在膜蛋白（integral membrane proteins ）与外周膜蛋白相对，区别在于与膜的结合强度不同。内在膜蛋白有一个或两个跨膜区，需要有效地溶解并与细胞内蛋白分离。此试剂盒既适用于培养的哺乳动物细胞，也适合硬或软的组织。与之前的Mem-PER试剂盒相比，Plus有不少好处，操作更简单，其组分可与许多下游应用直接兼容，如SDS-PAGE、Western blot、BCA和免疫沉淀等。

Mem-PER Plus是利用一种温和的去污剂来选择性富集内在膜蛋白和膜相关蛋白。通过这种选择性的提取方法，避免了基于疏水性的相分离法的繁琐，也实现了更好的重复性和更高的通量。

首先用一种温和的去污剂溶解细胞，让细胞内的可溶蛋白释放出来，之后用第二种去污剂来溶解膜蛋白。整个过程可在一小时内完成，不需要特殊的设备，只要有台式离心机、匀浆器和移液器就行了。当然，提取效率和产量要因细胞类型而异，也与跨膜次数相关。据介绍，带有一个或两个跨膜区的膜蛋白提取效率高达90%，且细胞内蛋白的污染通常不超过10%。

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