小鼠羟脯氨酸(Hyp)elisa试剂盒简介

羟脯氨酸( hydroxyproline ) 汉语读作:qiǎng fǔ＇ān suān

亚氨基酸，通常在第四位上带有羟基，但有时也在第3位上。由于有两个不对称的碳原子，所以有4种立体异构体。在动物胶和骨胶原中含有L-羟脯氨酸。自然界中不存在D-羟脯酸。L-别羟脯氨酸是从鬼笔鹅膏(Amanita Phalloides)中得到的有毒的多肽鬼笔环肽(phalloidine)的组成成分。一般的蛋白质不存在这种氨基酸。在自然界的羟脯氨酸的甲基衍生物中有左旋水苏碱(betonicine)、右旋水苏碱(turicine)〔这些都存在于林生水苏(Stachyssilvatica)和药水苏(betonica，officinalis)的叶和茎中〕和γ-羟古液酸(γ-hydroxyhygric acid)存在于巴豆属的 Croton gubonga的皮中。在生物体内羟脯氨酸是由脯氨酸合成的，但不是以游离状态，而是在肽链中被羟基化。它的分解作用类似脯氨酸，但以带着羟基的状态进行，所以成为4-羟基谷氨酸。与茚三酮反应会形成黄色溶液。

胶原蛋白是由18种氨基酸组成的，羟脯氨酸只是这18种氨基酸中的一种。但因为其在其他一些普通的蛋白中比较少见(如大豆蛋白)，所以可作为特征性的氨基酸，其含量多少是由这个胶原蛋白的原料来源决定的，而且在同一原料中，不同类型的胶原蛋白中羟脯氨酸含量也不一样。

人体蛋白质中以胶原蛋白含羟脯氨酸的量*多，而胶原蛋白是构成结缔组织中胶原纤维的主要成分。胶原纤维广泛分布于全身各种器官中，所以胶原蛋白是体内含量*多的蛋白质，约占人体蛋白质总量1/3。利用Hyp在胶原蛋白中含量这一特点，通过血液和尿液对Hyp的测定，可了解体内胶原蛋白分解代谢情况，即可作为结缔分解情况指标。临床检验普遍使用氨基酸自动分析仪效果满意。

小鼠羟脯氨酸(Hyp)elisa试剂盒技术简介

显色

　　显色是ELISA试验中*后一步温育反应，此时酶催化无色的底物生成有色的产物。反应的温度和时间仍是影响显色的因素。适当提高温度，有助于加速显色。在一定时间内，阴性孔可保持无色，而阳性孔则随时间的延长而呈色加强。在定量检测中，加入底物后的反应温度和时间应按规定力求准确。ELISA显色结果通过酶标仪进行，可减少实验误差，提高临界值样本的分析准确度。尽量避免肉眼直接判断结果，因为不同个体的视觉存在差异。应注意，加显色剂时，要保持显色剂不外流。加终止液时应避免产生较多气泡，否则可能使假阳性结果的出现概率增加。

比色

　　比色的方法有目视法和酶标比色法2种。目视法简单明了，但对同一标本，操作者的不同有时会出现不同的结果，具有一定的主观性。比色的结果通常用光密度表达，现按规定用吸光度表达。酶标仪不应安置在阳光或强光照射下，操作时的适宜室温在15℃~30℃之间，使用前要先预热仪器15~30min，使测得结果更为准确。比色前，应先用洁净的吸水纸擦拭干净板底附着的液体，然后将板正确放在酶标比色仪的比色架上。综上所述，优质的试剂，良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。在实际应用过程中，操作者必须熟练掌握基本操作技能，对每个环节进行严格仔细的核查，尽量避免假阳性和假阴性反应的出现，保证检测结果真实可靠，为临床诊断和疾病防治提供可靠的理论依据。

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