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技术文章

常见的蛋白酶抑制剂有哪些,不同蛋白酶抑制剂的作用

点击次数:19053 发布时间:2018/8/31 10:04:23

 常见的蛋白酶抑制剂有哪些,不同蛋白酶抑制剂的作用


蛋白酶是人类免疫缺陷病毒基因编码中的一种特异天冬酰蛋白酶,其作用是将基因和基因表达所产生的蛋白裂解,成为具有活性的病毒结构蛋白和酶。蛋白酶抑制剂从广义上指与蛋白酶分子活性中心上的一些基团结合,使蛋白酶活力下降,甚至消失,但不使酶蛋白变性的物质。
常见的蛋白酶抑制剂

 

抑制剂
靶蛋白酶
有效浓度
储藏溶液
注解
Antipain
木瓜酶和胰酶
50μg/ml
1mg/ml水溶液
对胰凝蛋白酶,胃液素,纤溶酶无影响
APMSF
胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶
10-40μg/ml或10-20μM
100mmol/L水溶液
毒性比PMSF低,不能抑制胰凝蛋白酶或乙酰胆碱酯酶
抑肽酶
丝氨酸蛋白酶
0.06-2μg/ml
10mg/mlPBS溶液
避免反复动冻融
抑氨肽酶B
氨基肽酶
40μg/ml
溶于甲醇
不能抑制羧肽酶
Calpain抑制剂Ⅰ、Ⅱ
Calpain (钙依赖性半胱氨酸蛋白酶)
Ⅰ:17μg/ml
Ⅱ:7μg/ml

溶于乙醇
可渗透薄膜
抑糜朊酶素
胰凝乳蛋白酶
6-60μg/ml
溶于DMSO

B.M.综合酶片
丝氨酸,半胱氨酸和金属蛋白酶
每10-50ml细胞提取液内加一片

不含EDTA
EDTA
金属蛋白酶
0.2-0.5mg/ml或0.5-1.3μmol/L
500mmol/L水溶液pH=8.0

抑蛋白酶醛肽
丝氨酸蛋白酶,巯基蛋白酶
0.5-2μg/ml
10mg/ml水溶液

a2-巨球蛋白
广谱
1∪/m
100∪/ml PBS 溶液
避免接触还原剂
Pefabloc SC(boe- hringer Mannheim)
丝氨酸蛋白酶
0.1-1.0mg/ml或0.4-4mmol/L
100mM水溶液
无毒,在中性pH下较PMSF 稳定
胃蛋白酶抑制剂
酸性蛋白酶
0.7μg/ml
1mg/ml甲醇溶液

PMSF
丝氨酸蛋白酶
17-170μg/ml
10mg/ml异丙醇溶液
每一操作步骤时新鲜加入
TLCK
胰蛋白酶
37-50μg/ml
1mg/ml溶于50mMmol/L醋酸盐溶液,pH=5.0
对胰凝蛋白酶无影响
TPCK
胰凝乳蛋白酶
70-100μg/ml
3mg/ml乙醇溶液
对胰蛋白酶无影响
 

不同蛋白酶抑制剂的作用
PMSF
1)抑制丝氨酸蛋白酶(如胰凝乳蛋白酶,胰蛋白酶,凝血酶)和巯基蛋白酶(如木瓜蛋白酶);
2)10mg/ml溶于异丙醇中;
3)在室温下可保存一年;
4)工作浓度:17~174ug/ml(0.1~1.0mmol/L);
5)在水液体溶液中不稳定,必须在每一分离和纯化步骤中加入新鲜的PMSF。EDTA
1)抑制金属蛋白水解酶;
2)0.5mol/L水溶液,pH8~9;
3)溶液在4℃稳定六个月以上;
4)工作浓度:0.5~1.5mmol/L. (0.2~0.5mg/ml);
5)加入NaOH调节溶液的pH值,否则EDTA不溶解。
胃蛋白酶抑制剂(pepstantin)
l)抑制酸性蛋白酶如胃蛋白酶,血管紧张肽酶,组织蛋白酶D和凝乳酶;
2)1mg/ml溶于甲醇中;
3}储存液在4℃一周内稳定,-20℃稳定6个月;
4)1作浓度:0.7ug/ml(1umol/L)
5)在水中不溶解。
亮抑蛋白酶肽(leupeptin)
1)抑制丝氨酸和巯基蛋白酶,如木瓜蛋白酶,血浆酶和组织蛋白酶B;
2)lOmg/ml溶于水;
3)储存液4℃稳定一周,-20℃稳定6个月;
4)工作浓度0.5ug/ml。
胰蛋白酶抑制剂(aprotinin)
1)抑制丝氨酸蛋白酶,如血浆酶,血管舒缓素,胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶;
2)lOmg/ml溶于水,pH7~8
3}储存液4℃稳定一周,-20℃稳定6个月;
4)工作浓度:0.06~2.0ug/ml(0.01~0.3umol/L);
5)避免反复冻融:
6)在pH>12.8时失活。

 常见的蛋白酶抑制剂有哪些,不同蛋白酶抑制剂的作用

原创作者:上海信帆生物科技有限公司

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