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做ELISA实验的时候,样本是选择血清还是血浆呢?

点击次数:16738 发布时间:2023/5/6 15:54:58

做ELISA实验的时候,样本是选择血清还是血浆呢?

做ELISA实验时,
检测的指标是用血清样本好还是用血浆样本?先给出结论我们在判定指标检测时:凝血功能类指标的检测选择血浆免疫类指标的检测选择血清对于其他类型指标,包括细胞因子的变化等,通常情况下血清或血浆都可以选择。


 

血清与血浆的区别

血清和血浆在颜色、密度、获取方式、成分、作用等方面存在不同。

1.颜色:血清是无色透明的,血浆是淡黄色的。

2.密度:血浆中成分较血清多,所以血浆的密度高于血清。

3.获取方式:血清是在不加入抗凝剂的情况下进行离心,离心后上层是血清,下层是凝血块。血浆是在加入抗凝剂的情况下进行离心,离心后进行分离获得的不含有血细胞的成分。

4.成分:血清中不含有血细胞、凝血因子等。血浆中不含有血细胞,但含有凝血因子。

5.作用:血清能够提供基本营养物质、结合蛋白等。血浆主要起到维持酸碱平衡、胶体渗透压等作用,还参与免疫、凝血等。

 

 血清中无纤维蛋白原和某些凝血因子;

 血清中无参与凝血的血浆蛋白;

 血浆中无一些凝血过程中血小板释放的物质。


Tips:血浆可以通过去除纤维蛋白原等凝血因子形成血清。


 血清多用于血液生化、免疫等方面的检测;

 血浆多用于凝血等方面的检测;

 全血则多用于血细胞、血常规、血沉等方面的检测。


血清及血清的主要成分

血清是指血液凝固后,血浆成分中除去纤维蛋白原某些凝血因子后分离出的淡黄色透明液体,它是不含血细胞(包括血小板)等成分的血液液体部分。

血清的主要成分

血清蛋白

总蛋白、白蛋白、α1、α2、β、γ-球蛋白等

糖类

葡萄糖、果糖、半乳糖、甘露糖

脂质

总胆固醇、三甘油脂、β-脂蛋白、HDL胆固醇

血清酵素

GOT、GPT、γ-GTP、LDH(乳酸脱水酵素)、淀粉酶、碱性碳酸酶、酸性碳酸酶、胆素脂酶、醛缩酶

激素

促甲状腺激素、甲状腺激素

色素

胆红素、吲哚青绿(ICG)、磺溴酞钠(BSP)

有机盐

肌氨酸酐、尿素氮、尿酸、肌氨酸酐·净化值

电解质

钠(Na)、钾(K)、钙(Ca)、氯(Cl)


 

浆与血浆的主要成分

血浆血液的重要组成部分,是全血经抗凝处理后,通过离心分离出全部血细胞(包括血小板),所获得的呈淡黄色透明液体的部分。血浆中含有纤维蛋白原(纤维蛋白原能转换成纤维蛋白,具有凝血作用)和凝血因子。

血浆的主要成分

血浆蛋白

可分为白蛋白、球蛋白和纤维蛋白原等

非蛋白氮

尿素、尿酸、肌酐、氨基酸、多肽、氨和胆红素等

无机盐

血浆中的无机物,绝大部分以离子状态存在。如:Na+、K+、Ca2+、Mg2+、Cl-、HCO3-、HPO42-、SO42-

在药代研究中二者各有优缺点:

① 血浆中含有抗凝物质(EDTA或肝素),可能干扰化合物的结合或检测,血清则无;

② 血浆制备快速,直接低温离心后即可分离,血清制备则耗时较长。这一点对药代试验影响较大,因给药后4小时内一般取血点较为密集;

③ 血清的凝血过程可能会与药物产生吸附作用,从而减少血清的含量,造成实验中的误差。


 

血清、血浆的制备方法

# 血清样本的制备 #

 使用热原、无内毒素的试管或离心管采集血液样本,将试管或离心管在室温下放置1小时或2-8℃过夜,分离出血清;

② 2-8℃条件下,以1000×g离心20分钟,小心收集上层血清。

# 血浆样本的制备 #

 使用含抗凝剂的采血管或离心管采集血液样本,采集后30分钟内,2-8℃条件下,以1000×g离心15分钟,小心收集上层血浆;

② 常见的抗凝剂包括:EDTA钠盐,肝素钠,枸橼酸钠等。ELISA实验中,通常推荐EDTA盐(EDTA-Na2或EDTA-K2)作为抗凝剂。

做ELISA实验的时候,样本是选择血清还是血浆呢?

原创作者:上海信帆生物科技有限公司

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