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技术文章
信帆生物教您如何高效解决ELISA实验中遇到的问题
点击次数：16570 发布时间：2023/8/4 14:25:29
| 信帆生物教您如何高效解决ELISA实验中遇到的问题 信帆生物提供高灵敏度，特异性好，即用型的ELISA试剂盒，长期与全国各大高校合作，引用文献上千篇。 ELISA试剂盒包含预包被酶标板、检测抗体、链酶亲和素标记的HRP、标准品、TMB显色液、终止液、洗液、封板膜、检测缓冲液等10个成分。 ELISA 常见问题及解决办法： 1. ELISA 试剂盒可以检测哪些类型的标本？ 我们的大多数 ELISA 试剂盒均适用于血清，血浆，细胞培养上清液和其它体液。在产品说明书和我们的目录上您会看到具体的适用范围。 2. 样本为什么需要稀释？ 1）在一些测试中，样本的读数高于标准曲线，为了得到更加准确的结果，需使分析物的含量在测定范围内，因此需要稀释； 2）以降低非特异性反应，使特异性的抗原抗体反应充分体现出来。  |
加样注意事项：
取出已恢复至室温的酶标板，加入300微升洗液，以洗去包被抗体保护剂，使包被抗体处于*佳活性状态，静置浸泡30秒。洗板结束后，立即使用酶标板，不要让酶标板干燥。
排版布局H1、H2孔为空白孔，A1、A1至G1、G2为标准曲线的S1至S7孔，每孔加入50微升的Assay Buffer，根据排版，每孔加入50微升标准品和样本，加样时，垂直悬空加入液体，加完后枪头轻轻碰液面（建议标准品，样本都做复孔），*后每孔加入50微升检测抗体，加完后用封板膜小心封好酶标板，为让抗原抗体充分接触。
取出已恢复至室温的酶标板，加入300微升洗液，以洗去包被抗体保护剂，使包被抗体处于*佳活性状态，静置浸泡30秒。洗板结束后，立即使用酶标板，不要让酶标板干燥。
排版布局H1、H2孔为空白孔，A1、A1至G1、G2为标准曲线的S1至S7孔，每孔加入50微升的Assay Buffer，根据排版，每孔加入50微升标准品和样本，加样时，垂直悬空加入液体，加完后枪头轻轻碰液面（建议标准品，样本都做复孔），*后每孔加入50微升检测抗体，加完后用封板膜小心封好酶标板，为让抗原抗体充分接触。
洗涤注意事项：
洗涤在ELISA过程中虽不是一个反应步骤，但却决定着实验的成败。ELSIA就是靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质，以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的，而在洗涤时应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。可以说在ELISA 操作中，洗涤是主要的关键技术，应引起操作者的高度重视，操作者应严格按要求洗涤，不得马虎。
原创作者：上海信帆生物科技有限公司
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