β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)测定试剂盒的组成

（ 比色法 50 管/24 样）

一、测定原理：

β-N- 乙 酰 氨 基 葡 萄 糖 苷 酶

（β-N-Acetylglucosaminidase，NAG）广泛存在于各种组

织器官、体液、红细胞、白细胞及血小板中，是溶酶体

中的一种酸性水解酶。底物在 NAG 作用下水解，释放

出游离的对硝基酚。加入碱性溶液停止反应，并使对硝

基酚显色。在 400nm 处测吸光度，可计算酶活力单位。

二、试剂组成及配制： (试剂 2-8℃保存，有效期 6 个月)

试剂一：溶液 40mL×1 瓶。

试剂二：底物，粉剂×1 支。

试剂三：终止剂 60mL×2 瓶。

试剂四：液体 6mL×1 瓶。(天冷会有结晶析出，测试前

置于 37℃水浴直至透亮)

试剂五：3mmol/L 对硝基酚标准贮备液 2mL×1 瓶。

0.6mmol/L 对硝基酚标准应用液的配制：将 3mmol/L 对

硝基酚标准贮备液用蒸馏水作 5 倍稀释，即

3mmol/L 对硝基酚∶蒸馏水=1∶4 稀释。

底物缓冲液的配制：底物溶解度小，配制底物溶液时，

应先用适量试剂一将试剂二粉剂 1 支调成糊

状，再边搅拌边逐渐加试剂一到 30mL，混匀

至溶解（不可加热）。配好后的底物缓冲

液为过饱和溶液，如有结晶，可静置或离心后

取上清进行检测。用不完的底物缓冲液 4℃可

保存两个月以上。

三、操作步骤：

五、注意点：

1、用分光光度计测定时吸光度至 0.60 或酶活力至 60 单位

呈线性，超出此范围应将标本用生理盐水稀释后重测，

结果乘以稀释倍数。

2、尿酶浓度随尿流率而变动，因此尿酶测定要求留取 24

小时尿；但因留 24 小时尿不方便，也不准确，故用“酶

单位/肌酐"比值计算酶排出率，效果较好。

附录Ⅰ: 大鼠肾皮质中 NAG 的测定

1、 样本前处理：

准确称取样本的重量，按照重量(g):体积(mL)=1 : 9

的比例，加入 9 倍体积的生理盐水，冰水浴条件下机械匀

浆，制成 10%匀浆，2500 转/分，离心 10 分钟，取上清

再用生理盐水稀释成 1%的匀浆液待测。（该匀浆浓度仅

为参考用，客户测定时可以根据这一浓度自行摸索样本的

实际所需浓度）

2、 操作步骤：

  β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)测定试剂盒的组成

原创作者：上海信帆生物科技有限公司