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细胞分离液试剂盒使用注意事项以及操作步骤详解
点击次数： 559发布时间：2011/3/7
- 上 传 者： 上海信帆生物科技有限公司
- 上传时间： 2015/8/24 14:25:20
- 文件大小： 6KB
- 文件类型： jpg
- 所属分类： 课件讲义
- 下载次数： 418次
- 查看次数： 559
资料简介：
人或各种动物外周血及脏器组织单核细胞分离液试剂盒
规格：2×100ml/kit
保存：室温避光储存
试剂盒内容：试剂：全血及组织稀释液100ml试剂：细胞洗涤液100ml试剂A100ml试剂D100ml说明书1 份一、分离方法说明及图例 二、A．在10ml或15ml玻璃离心管中依次小心加入A、D两种液体各2ml，制成梯度界面（各液面分层一定要清 晰）；B．取 1ml新鲜抗凝血或组织单细胞悬液（细胞浓度为2×108-1×109个/ml）按1：1比例与全血及组织稀释液 混匀并小心叠加于D液之液面上； C．以400g（约1500转/分）离心15分钟(半径15cm水平转子)；此时离心管中由上至下细胞分为六层。 层：为血浆（稀释液）层。第二层：为单核细胞层。第三层：为透明D液层。第四层：为淋巴细胞层。第五 层：为透明A液层。第六层：为极少量红细胞层。收集第二层单核细胞放入含4-5ml细胞洗涤液的试管中， 充分混匀后，以500g（约1500转/分）离心20分钟，弃去上清留沉淀细胞重新悬起。重复洗涤2次即得所需单 核细胞。注： 提取率约为80%。
分离图例： 见说明书
二、 注意事项A． 本分离液是敏光型的，在运输和贮藏过程中应在18℃-25℃避光保存，启封后置4℃保存避免微生物污 染。另外，本品为真空包装，未启封前置于10℃ 以下易出现白色结晶，影响分离效果。B． 待分离的样本要求新鲜，避免冷冻和冷藏。分离液和所分离样本一定在20℃水浴箱中复温20 分钟保证 分离液和所分离样本温度在20℃±2℃时分离效果，且所有操作过程一定要在无菌条件下进行。C． 由于各品牌离心机的性能不同，国内南北地区温度环境和四季的差异，可能影响分离效果，用户可以 调节离心转数，调节离心的时间，摸索*佳的分离条件（具体分离条件各实验室自定）。D． 使用无静电反应的离心管，推荐使用未经过碱处理的玻璃离心管。三、产品性能指标pH7.0-7.5渗透压280-340mOsmol/kg内毒素≤0.5EU/ml无菌直接接种培养14 天后培养基澄清 澄明度及不溶性颗粒物每50ml 溶液中含10μm 以上的不溶性微粒20 粒以下，含25μm 以上的不溶性微粒5 粒以下四、贮藏及保存期限18℃-25℃避光保存，有效期两年。启封后置4℃保存，有效期一周。
注：若保证无微生物污染，启封后可置4℃长期保存。但应注意保存温度较低时本分离液易出现白色结晶，影响分离效果。
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