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DNS试剂-(Ghose法)
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详细内容
【产品名称】:DNS试剂(Ghose法)
1、 还原糖的提取:
①称取植物样品0.5~3g,剪碎,加入蒸馏水约3ml匀浆,转移至烧杯或三角瓶中,用12ml蒸馏水冲洗研磨器2~3次,洗出液也转移至该容器。
②50℃水浴30min,并不时搅拌,以便还原糖彻底浸出。
③将沉淀和浸出液转移至50ml离心管,4000g离心5min。
④留取上清液,向沉淀中加入20ml蒸馏水,混匀,再次4000g离心5min。
2、 总糖的水解和提取:
①称取植物样品0.5~3g,剪碎,加入蒸馏水约3ml匀浆,转移至烧杯或三角瓶中,用12ml蒸馏水冲洗研磨器2~3次,洗出液也转移至该容器。
②向容器中加入10ml 6M盐酸溶液,搅拌均匀,煮沸30min,并不时搅拌。
③取2滴滴加于载玻片上,滴加1滴显色液,检查水解是否完全,如已经水解完全则不显示蓝色。
④水解完毕后,冷却至室温,加入6M氢氧化钠溶液,使溶液pH至7.4左右,用蒸馏水定容至100ml,混匀,4000g离心5min或过滤,获得上清或滤液。
⑤取上清或滤液10ml,用蒸馏水定容至100ml,成稀释10倍的总糖水解液(提取液),取1ml总糖水解液,测定其还原糖的含量。
1、 该试剂避免反复冻融,以免失效或效率下降,尽量避光保存。
2、 稀释盐酸和氢氧化钠溶液时,应小心操作,避免伤人。
3、 一般市售的浓盐酸摩尔数约为11.6M,应稀释至6M后使用。
4、 待测样本如不能及时测定,应置于2~8℃保存,3天内稳定。
5、 如果样品还原糖浓度过高,应用蒸馏水稀释后重测,结果乘以稀释倍数。
6、 总糖计算公式在测定干扰杂质很少、还原糖含量相对总糖含量很少时使用,×0.9是为了从测定出的总糖水解成单糖中,扣除水解时所消耗的水量。
DNS试剂(Ghose法)
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