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小鼠心肌肌钙蛋白T(cTn-T)ELISA检测试剂盒
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详细内容
英文名称:Mouse cTn-T ELISA Kit
产品货号:XFM21300
规格:48T/96T
检测范围:25 pg/mL – 800 pg/mL
储存条件:2-8℃
有效期:6个月
用途:本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中小鼠心肌肌钙蛋白T(cTn-T)的含量。
本产品仅供科研实验用,不做其他用途。
背景介绍: 心肌肌钙蛋白T(TNNT2或cTn-T)是一种35.9 kDa的蛋白质,由298个氨基酸组成。心肌Tn-T是心肌肌动蛋白细丝上三个肌钙蛋白亚单位(cTn-T、肌钙蛋白I(TnI)、肌钙蛋白C(TnC))中的一个。作为肌钙蛋白复合物的一部分,它的功能是调节肌肉的收缩。Tn-T的N端区域与肌动蛋白紧密结合,在强肌球蛋白横桥结合和发力时与Tm和肌动蛋白一起移动。
检测原理:
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被小鼠心肌肌钙蛋白T(cTn-T)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻-底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠心肌肌钙蛋白T(cTn-T)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中,不得使用叠氮钠做为防腐剂。
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
4. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。*后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
注:标本溶血会影响*后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
注意事项:
1、产品仅供科研实验使用,请勿用于食品、化妆品、临床医疗等其它用途。
2、使用时,请穿戴好实验服、防护面罩、一次性实验手套等,做好实验防护,严禁直接接触。摄入有害,严禁入口。
3、剩余产品请勿随意丢弃,请按照相关生物化学废弃物的处理规定,进行处理。
4、请按照保存要求妥善保存,使用后请密封避光保存。
小鼠心肌肌钙蛋白T(cTn-T)检测试剂盒
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