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人硫酸类肝素(HS)ELISA试剂盒说明书+实验指导

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品牌名称:$brandModel.Title(进口品牌)型号: 原产地:中国大陆 发布时间:2013/7/10 13:37:35更新时间:2024/11/26 14:28:39

产品摘要:上海信帆生物代理销售各种Elisa试剂盒,试剂盒性能稳定,操作方便,灵敏度高!全程提供技术指导,有质量问题,免费包退换,提供免费代测服务,欢迎联系!

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本产品仅供科研实验,不得用于医疗或食用。

人硫酸类肝素(HS)elisa试剂盒说明书+实验指导

【产品中文名称】 人硫酸类肝素(HS)ELISA Kit 
【产品英文名称】 Human heparan sulfate,HS ELISA Kit
【保存温度】 2-8℃,避光保存
【产品规格】 96T/48T 
【有效期】  6个月 




                   
操作流程  
1. 加入10 μL 校准品、质控品、待测样品到反应板孔内;  
2. 加入100 μL酶标抗体工作液到反应板孔内;  
3. 室温摇床温育120 min;  
4. 洗板6次;  
5. 加入1X底物工作液100 μL;  
6. 室温温育15 min;  
7. 加入100 μL终止液,摇匀约5 s;  
8. 用波长325 nm/420 nm的激发/发射光检测  
   
ELISA 试验时,注意事项如下:  
1. 正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。  
     有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。  
2. 在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:  
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。  
     其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:  
     用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。  
(2)包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。  
   吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18~24小时。蛋白质包被的适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)  
   进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值大而蛋白量少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。  
(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。  
    然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。  
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。  
   有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。  
    通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入 具体事项请来电咨询。  
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