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人血栓调节蛋白(TM)ELISA试剂盒说明书+实验指导
价格：￥1800
品牌名称：$brandModel.Title(进口品牌)型号： 原产地：中国大陆 发布时间：2013/7/15 14:53:49更新时间：2024/12/11 17:18:10
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本产品仅供科研实验，不得用于医疗或食用。| 【产品中文名称】 | 人血栓调节蛋白（TM）ELISA 试剂盒 | ||||||||
| 【产品英文名称】 | Human thrombomodulin,TM ELISA kit | ||||||||
| 【保存温度】 | 2-8℃，避光保存 | ||||||||
| 【产品规格】 | 96T/48T | ||||||||
| 【有效期】 | 6个月 | ||||||||
| 人血栓调节蛋白（TM）ELISA 试剂盒 | |||||||||
| 操作流程 | |||||||||
| 1. 加入10 μL 校准品、质控品、待测样品到反应板孔内； | |||||||||
| 2. 加入100 μL酶标抗体工作液到反应板孔内； | |||||||||
| 3. 室温摇床温育120 min； | |||||||||
| 4. 洗板6次； | |||||||||
| 5. 加入1X底物工作液100 μL； | |||||||||
| 6. 室温温育15 min； | |||||||||
| 7. 加入100 μL终止液，摇匀约5 s； | |||||||||
| 8. 用波长325 nm/420 nm的激发/发射光检测 | |||||||||
| 人血栓调节蛋白（TM）ELISA 试剂盒 | |||||||||
| ELISA 试验时，注意事项如下： | |||||||||
| 1. 正式试验时，应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件，待检样品应作一式二份，以保证实验结果的准确性。 | |||||||||
| 有时本底较高，说明有非特异性反应，可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。 | |||||||||
| 2. 在ELISA中，进行各项实验条件的选择是很重要的，其中包括: | |||||||||
| （1） 固相载体的选择：许多物质可作为固相载体，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。 | |||||||||
| 其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体，在使用前均可进行筛选： | |||||||||
| 用等量抗原包被，在同一实验条件下进行反应，观察其显色反应是否均一性，据此判明其吸附性能是否良好。 | |||||||||
| （2）包被抗体（或抗原）的选择：将抗体（或抗原）吸附在固相载体表面时，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间。 | |||||||||
| 吸附温度，时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18～24小时。蛋白质包被的适浓度需进行滴定：即用不同的蛋白质浓度（0.1、1.0和10μg／ml等） | |||||||||
| 进行包被后,在其它试验条件相同时，观察阳性标本的OD值。选择OD值大而蛋白量少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1～10μg／ml。 | |||||||||
| （3） 酶标记抗体工作浓度的选择：首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定（见酶标记抗体部份）。 | |||||||||
| 然后再固定其它条件或采取“方阵法”（包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度）在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。 | |||||||||
| （4） 酶的底物及供氢体的选择：对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应，而本身无色。有些供氢体（如OPD等）有潜在的致癌作用，应注意防护。 | |||||||||
| 有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体，如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后，应加入强酸或强碱以终止反应。 | |||||||||
| 通常底物作用时间，以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制，尤其是H2O2在临用前加入 具体事项请来电咨询。 | |||||||||
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