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人免疫球蛋白E(IgE)ELISA Kit
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详细内容
【产品中文名称】 | 人免疫球蛋白E(IgE)ELISA Kit | ||||
【产品英文名称】 | human Immunoglobulin E,IgE ELISA Kit | ||||
【保存温度】 | 2-8℃,避光保存 | ||||
【产品规格】 | 96T/48T | ||||
【有效期】 | 6个月 | ||||
人免疫球蛋白E(IgE)ELISA Kit | |||||
试剂盒组成 | |||||
30 倍浓缩洗涤液 | 20ml×1 瓶 | 终止液 | 6ml×1 瓶 | ||
酶标试剂 | 6ml×1 瓶 | 标准品(160ng/L) | 0.5ml×1 瓶 | ||
酶标包被板 | 12 孔×8 条 | 标准品稀释液 | 1.5ml×1 瓶 | ||
样品稀释液 | 6ml×1 瓶 | 说明书 | 1 份 | ||
显色剂A 液 | 6ml×1 瓶 | 封板膜 | 2 张 | ||
显色剂B 液 | 6ml×1/瓶 | 密封袋 | 1 个 | ||
标本要求 | |||||
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能 | |||||
马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融 | |||||
2.不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。 | |||||
人免疫球蛋白E(IgE)ELISA Kit | |||||
操作步骤 | |||||
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 | |||||
80 ng/L | 5 号标准品 | 150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液 | |||
40 ng/L | 4 号标准品 | 150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液 | |||
20 ng/L | 3 号标准品 | 150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液 | |||
10 ng/L | 2 号标准品 | 150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液 | |||
5.0 ng/L | 1 号标准品 | 150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液 | |||
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、 | |||||
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl, | |||||
然后再加待测样品10μl(样品终稀释度为5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽 | |||||
量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。 | |||||
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。 | |||||
4. 配液:将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用。 | |||||
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 秒后弃去,如此 | |||||
重复5 次,拍干。 | |||||
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。 | |||||
7. 温育:操作同3。 | |||||
8. 洗涤:操作同5。 | |||||
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色 | |||||
15 分钟。 | |||||
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。 | |||||
11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止 | |||||
液后15 分钟以内进行。 | |||||
人免疫球蛋白E(IgE)ELISA Kit | |||||
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