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绵羊主要组织相容性复合体(MHC)ELISA 试剂盒
价格：￥电议
品牌名称：$brandModel.Title(进口品牌)型号： 原产地：中国大陆 发布时间：2013/8/4 14:08:52更新时间：2024/11/26 14:28:51
产品摘要：上海信帆生物长期提供各种属elisa试剂盒，质量可靠，价格便宜，免费代测。周期短，数据准确。种属：人、大小鼠、豚鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、植物等欢迎致电咨询订购！更多产品、更详细信息请登录上海信帆有限生物公司网站 www.shxfbio.com！
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本产品仅供科研实验，不得用于医疗或食用。| 产品名称： | 绵羊主要组织相容性复合体（MHC）ELISA 试剂盒 | ||||||||
| 产品英文名称： | Sheep major histocompatibility complex,MHC ELISA kit | ||||||||
| 样本类型： | 血清，血浆，细胞上清液，组织等 | ||||||||
| 适用种属： | 大鼠，小鼠，兔子，绵羊，猪等 | ||||||||
| 规格型号： | 48T/96T | ||||||||
| 保存条件： | 2～8°C | ||||||||
| 绵羊主要组织相容性复合体（MHC）ELISA 试剂盒 | |||||||||
| 实验材料与试剂配制： | |||||||||
| 1. 仪器与材料：酶标仪（使用前预热30分钟，微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水，滤纸。 | |||||||||
| 2. 洗液的配制：按 1:100 1:100 的比例配制洗液备用。 样品收集、处理及保存 | |||||||||
| 1. 细胞培养上清：适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集上清液，以1000×g离心 | |||||||||
| 15分钟 ，收集上清。 | |||||||||
| 2. 细胞：用PBS反复洗涤细胞 3次，调整细胞浓度达到 10 4-10 6/ml左右，通过反复冻融， | |||||||||
| 使细胞破坏，并放出细胞内成份。或者细胞超声粉碎，离心取上清液检测。 | |||||||||
| 3. 血清： 在室温 下， 血液自然凝固，以 1000×g1离心 15 分钟 ，取上清待测。 | |||||||||
| 4. 血浆：应根据标本的要求选择 EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合后静置 10 -20 分钟后， | |||||||||
| 以1000×g离心15分钟，收集上清。 | |||||||||
| 5. 体液：包括胸腹水、脑脊液，分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集 ，以 1000×g | |||||||||
| 离心、15 分钟 ，收集上清。 | |||||||||
| 6. 组织标本：切取 组织标本，称取重量0.5mg加入500ul 的PBS，用手工或匀浆器，超声破碎仪， | |||||||||
| 将标本匀浆，以2000 -300rmp离心 20 分钟 ，收集上清进行检测 。 | |||||||||
| 7. 样品 中不能含有 NaN3，因 NaN3抑制辣根过氧化物酶的（ HRP）活性。 | |||||||||
| 8. 保存 ：如果样品不能立即检测 ，应将其分装， -80 ℃保存，避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀， | |||||||||
| 应再次离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或高脂。如果血清中含大量颗粒，检测前先离心或过滤。 | |||||||||
| 不要在 37 ℃或更高的温度加热解 或更高的温度加热解 或更高的温度加热解或更高的温度加热解或更高的 | |||||||||
| 温度加热解冻。应在室温下解并确保样品均匀地充分冻。应在室温下解并确保样品均匀地充分冻。 应在室温 | |||||||||
| 下解并确保样品均匀地充分冻。应在室温下解并确保样品均匀地充分解冻。 | |||||||||
| 绵羊主要组织相容性复合体（MHC）ELISA 试剂盒 | |||||||||
| 操作步骤 ： | |||||||||
| 1. 取出 试剂盒，室温（ 20 -25 ℃）放置 30 分钟。 | |||||||||
| 2. 分组： 取出 96 孔板 根据待测样品数 量加上标准品的数量决定所需板条，把剩余的板条继续冷藏处理， | |||||||||
| 分别设标准品组（6个浓度）、空白 孔、待测样品组。注：为减少实验误差，保证准确性，建议设置复孔。 | |||||||||
| 设置复孔。 | |||||||||
| 3. 加样：依照标准品的顺序分别加入100ul 的标准品溶液于空白微孔中；空白对照孔加入 100ul 的蒸馏水； | |||||||||
| 其余微孔中加入100ul的待测样本。 | |||||||||
| 4. 加酶标溶液：标准品组、待测样本组各孔中加入50ul 的酶标溶液 （空白对照孔除外）。 | |||||||||
| 5. 温育：酶标板用封板纸密封后，放入湿盒内于 37 ℃恒温孵育恒温孵育 1小时。 | |||||||||
| 6. 洗板： 用稀释后的洗涤液注满每孔，静置15 -30s 30s，充分清洗酶标板5次，用吸水纸彻底拍干。 | |||||||||
| 7. 显色：各孔加入显色剂A液 50ul 后，再加入显色剂 B液 50ul 。 | |||||||||
| 8. 终止： 25 -37 ℃下避光反应10 -15分钟， 加入 50 ul 终止液。 | |||||||||
| 9. 读板：在 450nm波长读取各孔的O 值。注： 读板时必须拭干板底残留的液体和手指痕迹，读板时间控制在 | |||||||||
| 终止反应后的30 分钟内，以免影响准确性。 | |||||||||
| 绵羊主要组织相容性复合体（MHC）ELISA 试剂盒 | |||||||||
| 数据计算 | |||||||||
| 1. 绘制标准曲线：各标准品 OD 值减去底色即坚强空白孔OD 值（数据处理如下），绘制标准曲线图。 | |||||||||
| 1.1软件处理：建议用户使logit-log模式或四参数据处理模式（ y=（a-d）/（1+（x/c）^b）+d ） | |||||||||
| 1.2计算器或手工作图处理：Logit-log 计算：以6个标准品OD 值的 Logit为纵坐标 y，以标准品的浓度的 log值 | |||||||||
| 为横坐标X，绘制曲线图。logit值计算公式如下:logit=ln（B/ B0）（1－B/ B0）手工作图： 以标准浓度取log值为横坐标， | |||||||||
| 对应的logit值为纵坐标，在普通坐标纸上或以标准浓度为横坐标，对应的 B/B0B为纵坐标在 logit-log坐标纸上画出 | |||||||||
| 准曲线（理想化时是一条直）。 | |||||||||
| 2. 根据待测样品的B/B0可以从坐标纸上查出样品的浓度值。注意：如果使用普通坐标纸，查出的数值应取反对数才是后浓度值。 | |||||||||
| 3.敏感度：1.0µmol/L | |||||||||
| 绵羊主要组织相容性复合体（MHC）ELISA 试剂盒 | |||||||||
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