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人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)ELISA 试剂盒
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品牌名称：$brandModel.Title(进口品牌)型号： 原产地：中国大陆 发布时间：2013/8/10 11:13:49更新时间：2024/11/26 14:29:27
产品摘要：上海信帆生物,试剂盒年中特卖,所有产品一律起售.试剂盒性能稳定,操作方便,灵敏度高!全程提供技术指导,有质量问题,免费包退换,提供免费代测服务,欢迎联系!人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)ELISA 试剂盒
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本产品仅供科研实验，不得用于医疗或食用。| 产品名称： | 人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）ELISA 试剂盒 | |||||
| 产品英文名称： | Human neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL ELISA kit | |||||
| 规格： | 48T/96T | |||||
| 检测方法： | 双抗体夹心酶联免疫法（ELISA） | |||||
| 标本： | 血清，血浆，细胞上清液，组织等 | |||||
| 种属： | Human\\人 | |||||
| 试剂盒说明书： | 请来电或者邮件索取 | |||||
| 人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）ELISA 试剂盒 | ||||||
| 实验材料与试剂配制： | ||||||
| 1. 仪器与材料：酶标仪（使用前预热30分钟，微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水，滤纸。 | ||||||
| 2. 洗液的配制：按 1:100的比例配制洗液备用。 样品收集、处理及保存 | ||||||
| 1. 细胞培养上清：适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集上清液，以1000×g离心15 | ||||||
| 分钟，收集上清。 | ||||||
| 2. 细胞：用PBS反复洗涤细胞 3次，调整细胞浓度达到10^4-10^6/ml左右，通过反复冻融， | ||||||
| 使细胞破坏，并放出细胞内成份。或者细胞超声粉碎，离心取上清液检测。 | ||||||
| 3. 血清： 在室温 下， 血液自然凝固，以1000×g离心15分钟，取上清待测。 | ||||||
| 4. 血浆：应根据标本的要求选择 EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合后静置 10 -20 分钟后， | ||||||
| 以1000×g离心15分钟，收集上清。 | ||||||
| 5. 体液：包括胸腹水、脑脊液，分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集 ，以 1000×g | ||||||
| 离心、15 分钟 ，收集上清。 | ||||||
| 6. 组织标本：切取 组织标本，称取重量0.5mg加入500ul 的PBS，用手工或匀浆器，超声破碎仪， | ||||||
| 将标本匀浆，以2000 -300rmp离心 20 分钟 ，收集上清进行检测 。 | ||||||
| 7. 样品 中不能含有 NaN3，因 NaN3抑制辣根过氧化物酶的（ HRP）活性。 | ||||||
| 8. 保存 ：如果样品不能立即检测，应将其分装，-80 ℃保存，避免反复冷冻。保存过程中如出现 | ||||||
| 沉淀，应再次离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或高脂。如果血清中含大量颗粒，检测前先离心 | ||||||
| 或过滤。不要在 37 ℃或更高的温度加热解 或更高的温度加热解 或更高的温度加热解或更高的温度 | ||||||
| 加热解或更高的温度加热解冻。应在室温下解并确保样品均匀地充分解冻。 | ||||||
| 人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）ELISA 试剂盒 | ||||||
| 操作步骤 ： | ||||||
| 1. 取出 试剂盒，室温（ 20 -25 ℃）放置 30 分钟。 | ||||||
| 2. 分组： 取出 96 孔板 根据待测样品数 量加上标准品的数量决定所需板条，把剩余的板条继续 | ||||||
| 冷藏处理，分别设标准品组（6个浓度）、空白 孔、待测样品组。 | ||||||
| 注：为减少实验误差，保证准确性，建议设置复孔。 | ||||||
| 3. 加样：依照标准品的顺序分别加入100ul 的标准品溶液于空白微孔中；空白对照孔加入100ul的 | ||||||
| 蒸馏水；其余微孔中加入100ul的待测样本。 | ||||||
| 4. 加酶标溶液：标准品组、待测样本组各孔中加入50ul 的酶标溶液 （空白对照孔除外）。 | ||||||
| 5. 温育：酶标板用封板纸密封后，放入湿盒内于 37 ℃恒温孵育恒温孵育 1小时。 | ||||||
| 6. 洗板：用稀释后的洗涤液注满每孔，静置15 -30s 30s，充分清洗酶标板5次，用吸水纸彻底拍干。 | ||||||
| 7. 显色：各孔加入显色剂A液 50ul 后，再加入显色剂 B液 50ul 。 | ||||||
| 8. 终止： 25 -37 ℃下避光反应10 -15分钟， 加入 50 ul 终止液。 | ||||||
| 9. 读板：在 450nm波长读取各孔的O 值。注： 读板时必须拭干板底残留的液体和手指痕迹， | ||||||
| 读板时间控制在终止反应后的30 分钟内，以免影响准确性。 | ||||||
| 人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）ELISA 试剂盒 | ||||||
| 数据计算 | ||||||
| 1. 绘制标准曲线：各标准品 OD 值减去底色即坚强空白孔OD 值（数据处理如下），绘制标准曲线图。 | ||||||
| 1.1软件处理：建议用户使logit-log模式或四参数据处理模式（ y=（a-d）/（1+（x/c）^b）+d ） | ||||||
| 1.2计算器或手工作图处理：Logit-log 计算：以6个标准品OD 值的 Logit为纵坐标 y，以标准品的 | ||||||
| 浓度的 log值为横坐标X，绘制曲线图。logit值计算公式如下:logit=ln（B/ B0）（1－B/ B0）手工 | ||||||
| 作图：以标准浓度取log值为横坐标，对应的logit值为纵坐标，在普通坐标纸上或以标准浓度为 | ||||||
| 横坐标，对应的 B/B0B为纵坐标在 logit-log坐标纸上画出标准曲线（理想化时是一条直）。 | ||||||
| 2. 根据待测样品的B/B0可以从坐标纸上查出样品的浓度值。注意：如果使用普通坐标纸，查出的 | ||||||
| 数值应取反对数才是*后浓度值。 | ||||||
| 3.敏感度：1.0µmol/L | ||||||
| 人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）ELISA 试剂盒 | ||||||
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| 上海信帆实验室代测项目：放免代测，免疫组化代测，荧光定量PCR代测，病理细胞染色代测， | ||||||
| WB实验，蛋白表达与纯化，ELISA酶联免疫代测等 | ||||||
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