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简要原理:
微孔板上包被有抗抗体,将氯霉素标准品或样品、酶标记
氯霉素及氯霉素抗体加入到微孔中。样品中的氯霉素抗体
被抗抗体固定在微孔板上。游离氯霉素与酶标记氯霉素竞
争结合氯霉素抗体,洗去未结合的酶标记氯霉素。加入底
物,在酶作用下溶液显黄色,再加入终止液,会变成桔黄
色。在450 nm波长光下读数。当游离氯霉素的含量升
高,竞争结合氯霉素抗体的酶标记氯霉素就减少,显色变
浅,两者呈反比。根据标准品的读数作出标准曲线,并利
用标准曲线读出样品中氯霉素的含量。
试剂盒的组成:
酶标反应板:96孔易折板,抗抗体已包被;
氯霉素标准品:1 mL/瓶×6瓶,浓度(ppb, ng/mL):0、0.05、0.3、1、3、10;
酶标记氯霉素:6 mL/瓶;
氯霉素抗体:6 mL/瓶;
洗涤液:10 mL/瓶,稀释50倍使用;
底物:4片,每片溶于5ml底物缓冲液中使用;
底物缓冲液:40 mL/瓶;
终止剂:6 mL/滴瓶