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实验方法总结：大鼠β-防御素（β-DF）ELISA试剂盒
大鼠β-防御素(β-DF)elisa试剂盒 Rat β-Defensins,β-DF ELISA Kit ，规格：96T/48T，产品别名： 大鼠β-防御素(β-DF)检测试剂盒
大鼠β-防御素(β-DF)ELISA试剂盒原理的简要说明书：β-Defensin，β－防御素。β-Defensin是一种富含半胱氨酸阳离子多肽，含有 6个稳定的半胱氨酸，分别以 l－6，2－4，3一5连接形成三个分子的二硫键，构成稳定的反相平行的三股β一片层结构。二流键可以使小分子防御素紧密联结以防御蛋白酶水解，所以在富含蛋白的吞噬溶酶体环境中仍能保持其特性，这也是防御素区别与其他抗微生物肽的主要因素。pBD－1除上述结构外，还含有2个精氨酸、7个赖氨酸，且在成熟的肽中不含有阴离子残基。预先包被的β-Defensin(β－防御素)抗体为多克隆β-Defensin(β－防御素)抗体。检测相β-Defensin(β－防御素)抗体也为多克隆β-Defensin(β－防御素)抗体，经生物素(biotin)标记。样品和生物素标记β-Defensin(β－防御素)抗体先后加入酶标板孔反应后，PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应；经过PBS或TBS的彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测因子呈正相关。
1，包是非常重要的，蛋白质浓度，原来的性质是否降解，抗体，使你可以识别，从而节省抗原是非常重要的，我做的重组蛋白，他严厉警告我必须在冰浴是缓慢的融化是真理。有一些涂层可不是蛋白质，生物素和脂类或小分子，我们的装修之前涂，我简要如下： 2460亲和素-生物素抗生物素蛋白涂层：载体，加入生物素标记的，这种镀膜的方法均匀，牢固，已扩大应用于各种抗原定量测定。脂质：可以在有机溶剂（如酒精）孔加入溶解后，打开冰箱隔夜或冷干，待酒精挥发，在固体表面上进行自然干燥的固体脂质。小分子必须依靠和大的载体蛋白偶联可以固定在固体载体上。
2，包衣液的选择，碳酸盐缓冲液通常选择9。6。但有时因为测试需求，数据包缓冲溶液是一种特殊的原料可采用中性包装。应注意以下原则：蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合，取决于在固相的疏水性基团和疏水性相互作用的载体表面蛋白分子的结构，物理吸附是非特异性的，蛋白分子量，等电点，大集中，小分子蛋白蛋白质通常含有疏水基团越多，所以更容易吸附在固相载体表面。测试也有很强的理论于实践，看*后一个可以应用到我们的测试。除了刚才提到的9。6碳酸盐缓冲液常用的涂料溶液，和磷酸盐缓冲液和7-8 7。2 -缓冲。
3，关闭：以下包之后是无关的蛋白质溶液浓度高，涂层工艺。随函附上使大量不相关的蛋白质充填这些空隙，和干扰物质的免疫排斥和吸附步骤。ELISA试剂盒常用的密封：0。05% - 0。5%牛血清白蛋白；10%或1%明胶牛血清；脱脂奶粉，价格相对低廉，可用于高浓度（5%～10%）；和一些罕见的使用各种动物血清（主要是为了消除类似的蛋白和酪蛋白等干扰）。但到底选择什么，根据实验的具体实践。
4，洗板：可以说，在中操作，清洗是在主要的关键技术。由于聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍存在的，为了实现自由酶与客观相结合的标记的分离，在板料孔中残留游离和吸附的非特异性干扰物质的去除，洗涤，并应将干扰物质洗涤下来的非特异性吸附。所以在洗衣板会有一定的误差，非常人的因素（当然也有洗衣机除条件），是不完整的或弦清孔，系统的影响是如此敏感，但不小。
5，加抗体（抗标本和两个）：注意的枪头，枪头。样品用稀释稀释，也可以用稀释的闭解。如果要添加两个电阻，但也要注意两个反工作浓度的废物，太高，太低的光的颜色。
6，颜色：颜色系统有很多，我们开始做，选择适当的颜色系统。ELISA试剂盒注意颜色系统酶底物结合物加硫柳泵节约，缀合物加叠氮化钠。
7，每次都尽可能的阴和阳空三控制，如分析问题的出现。
原创作者：北京雅安达生物技术有限公司
