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技术文章
205311QuantiTect Reverse Transcription Kit实验说明
快速合成cDNA,进行两步法real-time RT-PCR,用于基因表达分析
- cDNA合成和gDNA去除仅用20分钟完成
- 即便是低丰度的转录本也能获得高产量的cDNA
- 转录本的5'和3'端区域都可以进行cDNA合成
- 无需设计RNA特异性引物或探针
QuantiTect Reverse Transcription Kit通过方便快速的操作过程进行cDNA合成,并有效去除基因组DNA。应用gDNA Wipeout Buffer可高效去除RNA样本中的基因组DNA污染。QuantiTect Reverse Transcription Kit提供所有快速、高效逆转录所需的组分,包括Quantiscript Reverse Transcriptase、Quantiscript RT Buffer和独特的RT Primer Mix。合成的cDNA经过优化可用于real-time PCR,实现对mRNA转录本所有区域的靶分子进行可靠的定量检测。
QuantiTect Reverse Transcriptase是Omniscript和Sensiscript Reverse Transcriptases的新型混合物,对RNA具有高亲和性,可从各种含量的RNA(10 pg到1 µg)合成cDNA。与其他供应商提供的试剂 盒相比,QuantiTect Reverse Transcription Kit为real-time PCR分析提供高产量的cDNA,无需考虑待扩增目标序列位于转录本的哪个区域。即使复杂的模板也能成功逆转录,如GC含量高或有复杂二级结构的模板。 QuantiTect RT Buffer已经过优化,可与real-time PCR缓冲液兼容。
为获得准确的real-time RT-PCR基因表达分析结果,很重要的是仅扩增和检测cDNA。基因组DNA的干扰可通过设计横跨外显子/外显子边界的引物或探针避免。尽管如此,在某 些特殊情况下(如:cDNA来自一个单外显子基因),起始RNA样品必须无基因组DNA。使用QuantiTect Reverse Transcription Kit,基因组DNA污染物可使用独特的gDNA Wipeout Buffer迅速有效的去除。使用gDNA Wipeout Buffer可节省时间和费用,因为纯化RNA样品过程中或纯化后均无需另外采用DNase消化。另外,不需要设计RNA特异性引物或探针。
原创作者:北京雅安达生物技术有限公司