试剂组成

1.预包被板48T/96T;                         6. 样本稀释液（5号液） 1支;

2. 酶结合物（1号液）1支;                     7. 终止液（6号液） 1支;

3. 洗涤液（2号液）1支;                        8. 阳性对照品 1支;

4. 底物（3号液）1支;                           9. 阴性对照品 1支;

5. 显色剂（4号液）1支;                       10. 使用说明书 1份;

操作程序

·        加样反应：取出所需量的反应板条，每孔加样本稀释液（5号液）2滴，再分别加入待检的血清样本10ul，混匀。同时设阴性、阳性及空白对照各1孔，阴性、阳性对照与待检样本同步处理，空白对照孔仅加入样本稀释液（5号液）2滴。37℃避光反应30分钟后甩去孔内液体，每孔加洗涤液（2号液）1滴，立即用蒸馏水注满，静置30秒后甩去，再直接用蒸馏水洗涤四次，甩去，拍干。

·        加酶反应：除空白对照孔外其余每孔加酶结合物（1号液）2滴，37℃避光反应30分钟后甩去孔内液体，如上洗涤，拍干。

·        显色反应：加底物（3号液）和显色剂（4号液）各1滴，混匀，37℃下避光显色10分钟。加终止液（6号液）1滴，混匀，终止反应（加终止液后蓝色会变为黄色）并观察结果。

结果判断

·        肉眼观察：阴性对照接近无色，阳性对照呈明显黄色，表示试验有效。待检孔接近无色表示该标本为阴性，待检孔呈明显黄色表示该标本为阳性。

·        仪器判断：以空白对照调零用酶标仪于450nm（620nm作参比波长）读取O.D值，待检孔O.D值大于阴性对照2.1倍者为阳性。当阴性对照O.D值低于0.05时按0.05计算。

注意事项

·        试剂盒在2-8℃下保存，每次取出时先平衡至室温后使用。滴瓶每次用后一定要将盖拧紧，各瓶盖之间切不可混用。各试剂盒之间不可混用。

·        洗涤时将蒸馏水加满孔内，每次停放三十秒钟，甩去孔内液体。禁用自来水等其它水源。

·        为提高试验的可比性，建议使用仪器判读结果。

·        如有条件，使用水浴箱孵育。