您的位置:易推广 > 行业仪器 > 纺织行业 > 印染类 > 上海义森生物科技有限公司 > 产品展示 > 实验室耗材 > AllPrep DNA/RNA FFPE Kit

产品展示

AllPrep DNA/RNA FFPE Kit

点击次数:844发布时间:2013/10/30 16:25:01

AllPrep DNA/RNA FFPE Kit

更新日期:2024/9/10 16:48:15

所 在 地:中国大陆

产品型号:80234

简单介绍:AllPrep DNA/RNA FFPE Kit (50)50 RNeasy MinElute Spin Columns, 50 QIAamp MinElute Spin Columns, Collection Tubes, RNase-Free Reagents, and Buffers80234

相关标签:AllPrep DNA/RNA FFPE Kit  80234 qiagen 

优质供应

详细内容

 


AllPrep DNA/RNA FFPE Kit (50)
50 RNeasy MinElute Spin Columns, 50 QIAamp MinElute Spin Columns, Collection Tubes, RNase-Free Reagents, and Buffers
80234  

从福尔马林固定、石蜡包埋的组织切片中同时纯化基因组DNA和总RNA(包括小RNAs)

 
  • 使用小样本量即可获得大量纯化产物
  • 在纯化同时,保持DNA和RNA的完整性
  • 高效分离RNA和DNA
  • 对同一FFPE样本进行全面的DNA和RNA分析

如要对基因组学和转录组学数据进行可靠比较,则需从同一样本中纯化DNA和RNA。AllPrep DNA/RNA FFPE Kit使用的溶解方法,从福尔马林固定、石蜡包埋的组织样本中纯化DNA和RNA。纯化产物适用于real-time PCR和焦磷酸测序等应用。

 
  •  订购信息
  •  详细信息
  •  技术参数
  •  相关资料
  • Purification of DNA and RNA from FFPE samples
  • Array analysis following preamplification of cDNA targets
  • Reliable amplification of DNA and RNA from FFPE samples
  • AllPrep DNA/RNA FFPE procedure
 
  • 1
  • 2
  • 3
  • 4
 
 
对预扩增的cDNA进行芯片分析。
使用AllPrep DNA/RNA FFPE Kit从人类乳腺FFPE组织中纯化总RNA。然后使用RT2FFPE PreAMP技术进行逆转录。使用Human Cell Cycle RT2 Profiler PCR Array,通过real-time PCR进行基因表达分析,将肿瘤样本与非肿瘤样本进行对比。ΔΔCT分析显示:肿瘤样本中的基因表达与非肿瘤样本的基因表达存在x倍的差异。
打开图片
 
性能
使用AllPrep DNA/RNA FFPE Kit纯化的DNA和RNA的质量与使用QIAamp FFPE Tissue Kit和RNeasy FFPE Kit/miRNeasy FFPE Kit纯化的产物的质量相当(参见Purification of DNA and RNA from FFPE samples)。因此,纯化产物可用于焦磷酸测序、real-time PCR和RT-PCR等下游应用(参见Reliable amplification of DNA and RNA from FFPE samples和Array analysis following preamplification of cDNA targets)。
原理

AllPrep DNA/RNA FFPE Kit专为从FFPE样本中同时纯化基因组DNA和总RNA而设计。该试剂盒可使用同一样本纯化DNA和RNA,而非像其他纯化方法那样,需将样本分为两份再分别进行纯化操作。如将样本分为两份分别纯化DNA和RNA,其纯化出的DNA和RNA来自不同的细胞群落,可能具有不同性质特征。从同一样本中同时纯化DNA和RNA可减少浪费,因为FFPE样本是十分珍贵的样本,通常很难恢复且样本量少。

由于固定和包埋,FFPE样本中的核酸通常都严重片段化,核酸的分子量通常小于从新鲜或冷冻样本中分离出的核酸的分子量。从同一FFPE样本中分离DNA和RNA面临着很大困难:片段化的DNA长度短,且部分是单链结构;因此其更像RNA,而非完整的DNA。片段化DNA这一特性使得用物理方法分离DNA和RNA十分困难。AllPrep DNA/RNA FFPE Kit使用的溶解方法,从同一个FFPE样本中分别释放DNA和RNA。

尽管标准的质量控制分析(如凝胶电泳或芯片分析方法)无法检测到甲醛的化学修饰,但其对酶分析有严重干扰。AllPrep DNA/RNA FFPE Kit已经过优化,可程度上逆转甲醛化学修饰,而不引起DNA和RNA的进一步降解。

操作流程
简单的流程可从同一个样本中纯化高品质DNA和RNA(参见AllPrep DNA/RNA FFPE procedure)。AllPrep DNA/RNA FFPE Kit使用的溶解方法,从同一个FFPE样本中分别释放DNA和RNA。使用这种方法时,FFPE样本要在优化的裂解缓冲液中孵育,使得RNA释放出来,而DNA形成沉淀。离心后,将含有RNA的上清和含有DNA的沉淀分别处理,纯化RNA和DNA。再次进行孵育有一定的解交联作用,然后使用RNeasy MinElute或QIAamp MinElute离心柱纯化RNA和DNA。用柱上DNA酶处理纯化的RNA,以有效去除DNA污染。根据RNA与离心柱的结合情况,纯化的RNA中可能含有也可能不含miRNA等小RNAs。对于纯化后的DNA,可选择性进行柱上RNA酶消化,因为在离心前的DNA和RNA分离步骤中RNA污染水平已达到。
应用

尽管AllPrep DNA/RNA FFPE Kit已经过优化,可程度上逆转福尔马林化学修饰,而不引起DNA和RNA的进一步降解;但从FFPE样本中纯化获得的核酸不应该用于需要大分子量DNA或完整长度RNA的下游应用。一些应用可能需要进行化学修饰后,再使用片段化核酸(如:设计PCR和RT-PCR的小扩增子)。在cDNA合成中,应使用基因特异性引物,而非oligo-dT引物。如果无法使用基因特异性引物,则可使用任意引物。

联系我们

联系人:邓冉

点击查看联系方式

企业档案

  • 会员类型:免费会员
  • 工商认证: 【未认证】
  • 最后认证时间:
  • 法人:
  • 注册号:****
  • 企业类型:经销商
  • 注册资金:人民币万

script>
在线咨询

提交