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AllPrep DNA/RNA FFPE Kit (50) 50 RNeasy MinElute Spin Columns, 50 QIAamp MinElute Spin Columns, Collection Tubes, RNase-Free Reagents, and Buffers | 80234 |
从福尔马林固定、石蜡包埋的组织切片中同时纯化基因组DNA和总RNA(包括小RNAs)
- 使用小样本量即可获得大量纯化产物
- 在纯化同时,保持DNA和RNA的完整性
- 高效分离RNA和DNA
- 对同一FFPE样本进行全面的DNA和RNA分析
如要对基因组学和转录组学数据进行可靠比较,则需从同一样本中纯化DNA和RNA。AllPrep DNA/RNA FFPE Kit使用的溶解方法,从福尔马林固定、石蜡包埋的组织样本中纯化DNA和RNA。纯化产物适用于real-time PCR和焦磷酸测序等应用。
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AllPrep DNA/RNA FFPE Kit专为从FFPE样本中同时纯化基因组DNA和总RNA而设计。该试剂盒可使用同一样本纯化DNA和RNA,而非像其他纯化方法那样,需将样本分为两份再分别进行纯化操作。如将样本分为两份分别纯化DNA和RNA,其纯化出的DNA和RNA来自不同的细胞群落,可能具有不同性质特征。从同一样本中同时纯化DNA和RNA可减少浪费,因为FFPE样本是十分珍贵的样本,通常很难恢复且样本量少。
由于固定和包埋,FFPE样本中的核酸通常都严重片段化,核酸的分子量通常小于从新鲜或冷冻样本中分离出的核酸的分子量。从同一FFPE样本中分离DNA和RNA面临着很大困难:片段化的DNA长度短,且部分是单链结构;因此其更像RNA,而非完整的DNA。片段化DNA这一特性使得用物理方法分离DNA和RNA十分困难。AllPrep DNA/RNA FFPE Kit使用的溶解方法,从同一个FFPE样本中分别释放DNA和RNA。
尽管标准的质量控制分析(如凝胶电泳或芯片分析方法)无法检测到甲醛的化学修饰,但其对酶分析有严重干扰。AllPrep DNA/RNA FFPE Kit已经过优化,可程度上逆转甲醛化学修饰,而不引起DNA和RNA的进一步降解。
尽管AllPrep DNA/RNA FFPE Kit已经过优化,可程度上逆转福尔马林化学修饰,而不引起DNA和RNA的进一步降解;但从FFPE样本中纯化获得的核酸不应该用于需要大分子量DNA或完整长度RNA的下游应用。一些应用可能需要进行化学修饰后,再使用片段化核酸(如:设计PCR和RT-PCR的小扩增子)。在cDNA合成中,应使用基因特异性引物,而非oligo-dT引物。如果无法使用基因特异性引物,则可使用任意引物。