用于检测水样中（底下水、井水、海水）中多溴化联苯的检测。如果要检测其它样品请联系我公司取得相关前处理资料。
PBDE检测试剂盒的原理是酶联免疫反应检测方法。样品和结合有PBDE抗体的磁性颗粒一起加入一次性玻璃试管。然后加入PBDE酶结合物。样品中的PBDE与PBDE酶结合物中的PBDE竞争磁性颗粒上抗体的结合位点。反应20分钟。利用磁场固定住试管中的磁性颗粒除去没有结合的试剂。加入底物（过氧化氢和TMB）来检测样品中的PBDE.结合在PBDE抗体上的PBDE酶结合物催化底物产生有色物质。孵育20分钟加入酸终止反应。结合物中的PBDE和样品中的PBDE是竞争关系所以显色的强度和样品中PBDE的浓度成反比。

 多溴化联苯检测试剂盒说明书试剂盒组成

储存和稳定性

检测试剂盒应该置于2–8°C保存，不冷冻保存。在有效期内都可以使用。在试剂盒中不要求储存条件的可以分开放置，这样可以节省冰箱的空间。检测试验结束后的垃圾按当地的法规处理。

剂盒未提供的材料

1、250-1000ul的移液器及吸头

2、震荡器

3、磁力分离架

4、450nm的酶标仪

样品信息

这个方法用于检测水样。如果要检测其它样品需要修改检测步骤并验证。样品保存在一氯醋酸和其它酸中，在检测前要用强碱如：6N NaOH中和。如果样品中的PBDE的浓度超过1 ppb，样品需要稀释后再测定。推荐使用零标准/样品稀释液对样品进行10倍或更大的稀释。例如，在一个试管中加入100 μL的样品和900 μL零标准/样品稀释液。在检测前要充分混合。根据操作步骤进行检测，在获的*终的结果时要乘以稀释倍数10.

以下物质的浓度不大于1000 ppm时对检测结果没有明显影响：铜、锌、镁、钙、锰、磷酸盐、氯化钠、硫酸盐、硝酸盐。腐植酸和硫酸亚铁的浓度达到100p pm时对检测结果没有影响。

试剂制备

在检测时所有试剂都要恢复到室温。结合有抗体的磁性颗粒在使用前要混合。

注意

和所有的免疫检测方法一样，稳定的技术是一个良好的操作的关键。为了得到*精确的结果要确保每个孔的操作都要一致。试剂直接加入孔的底部，吸头不要和孔中其他液体接触，这可以保证每个孔中的试剂的量是一致的。添加液体时每个样品都要使用新的吸头，同时要避免微孔壁上的液滴和吸头上的液滴接触来避免交叉污染。在震荡过程中避免产生泡沫。

磁性分离架有两部分构成：这个较高的架子可以安全的固定试管和一个低的分离器（这个分离器包含磁石，用于吸附包被抗体的磁性颗粒）。在孵育过程中从低的分离器上移除了较高的架子，这样可以使磁性颗粒保持悬浮.在分离步骤中这个架子和分离器被安装在一起,可以把磁性颗粒吸附到测试管的边上。

为了获得*佳的测定结果,在分离步骤中一定要小心，保持每个步骤都一致。从分离器上拿起支架，慢慢翻转来倾倒测试管中的液体，动作一定要平缓保证液体是沿着试管的一边持续的流出。一直到支架反了过来的时候放在吸水垫上面使试管壁上的液体被吸出。提起来支架然后再放到吸水垫上面，反复操作几次确保试管壁上的液体全部被移除。在吸取包被抗体的磁性颗粒前要把其混均匀。标准和对照管在不使用时要把盖盖上阻止液体挥发。不要使用过期产品，避免终止液与皮肤和粘膜接触，如果不小心接触了请马上用大量的水冲洗。

限制

Abraxis PBDE检测试剂盒可以不同程度地检测不同的PBDE。相关数据请看特异性数据。此试剂盒可以提供检测结果。和其他方法一样，对于阳性样品需要用传统的方法(GC,HPLC, etc...)来验证。吸取磁性颗粒的总时间要小于2分钟或更少，因此要根据自己的能力来确定在每次检测时测几个样品，一定要保证磁性颗粒在2分钟内吸取完。

质量控制

试剂盒中提供了一个浓度为0.25 ppb 的PBDE溶液。推荐在每次检测时都对这个溶液做和样品一样的处理进行检测。同时实验室应该建立可以接受的限定。

测试步骤

在操作之前一定要仔细阅读以上内容。

1、对于水样可以直接按此说明书处理，如果是其它样品颗粒请联系我公司索取特定的样品处理方法。

2、标记测试管，使标准、样品和对照区分开。

3、在对应的测试管中加入250 uL标准，对照或样品。

4、混匀包被有PBDE抗体的磁性颗粒溶液，然后每个测试管加入500 uL。

5、涡旋震荡1到2秒，尽量不要产生气泡。

6、在室温下孵育20分。

7、在每个测试管加入250 ul PBDE 酶结合物。

8、涡旋震荡1到2秒，尽量不要产生气泡。

9、在室温下孵育20分。

10、在磁性分离器上分离2分钟。

11、从分离器上拿起支架，慢慢翻转来倾倒测试管中的液体，动作一定要平缓保证液体是沿着试管的一边持续的流出。一直到支架反了过来的时候放在吸水垫上面使试管壁上的水被吸出。提起来支架然后再放到吸水垫上面，反复操作几次确保试管壁上的液体全部被移除。

12、每个测试管中加入1 mL洗液，震荡1-2秒，再在磁性分离器上分离2分钟。

13、用同样的操作手法轻轻倒出所有测试管中的液体，并轻轻地把剩余液体吸取干净。

14、重复10和11一次。

15、从分离器上拿下支架，然后每个测试管中加入500 uL的显色液。

16、震荡1到2秒，尽量不要产生气泡。

17、在室温下孵育20分。

18、在每个测试管中加入500 uL的终止液。

19、在一个干净的测试管中加入1 mL洗液，作为步骤17中的空白。

20、在加入终止液15分钟后，在450nm的分光光度计测定。

 多溴化联苯检测试剂盒说明书结果

手工计算

1、 计算每个标准的吸光度值。

2、 计算每个标准的%B/Bo（每个标准的吸光度值除以 稀释剂/零标准 的吸光度值）。

3、 以每个标准的%B/Bo值的Log 为Y轴，PBDE浓度的对数为X轴作图绘制标准曲线。

4、 把样品或对照的%B/Bo插入到标准曲线就可以计算出结果。

光度计分析仪

一些公司已经生产出可以自动绘制标准曲线的吸光度分析仪，并且配有详细的操作说明书。为了用这个设备从Abraxis 多溴化联苯 检测试剂盒获得检测结果，允许对部分参数进行设定。

操作性能数据

敏感性

 PBDE检测试剂盒的检测限是位于90% B/Bo 时对应的浓度17 ppt。