齐一生物试剂盒组分经过重重优化，每个组分的稳定性都完美的经过高温破坏测验，程度的避免了长途运输和保存过程中抗原抗体的失活.齐一生物试剂盒凭借其完美的标曲.严格的质控.稳定高、易保存，操作简便，已广泛应用在全国免疫学检验研究所的各领域中.深受研究者们的青睐. 齐一生物销售：021－6034 8496；181214 53965；173021 04490

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【友情提示】：本产品仅供科研研究使用，不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失，请仔细阅读购买说明！

试验所需自备物品:

1. 酶标仪(450nm 波长滤光片)

2. 高精度移液器，EP 管及一次性吸头

3. 37℃恒温箱，双蒸水或去离子水

4. 吸水纸

【人丙酮酸激酶M2型同工酶（M2-PK）ELISA试剂盒】试剂盒安全性提示：

1.工作人员实验中避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。

2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

操作注意事项：

1.试剂盒应按标签说明书储存，使用前恢复到室温30分钟后方可使用。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

3.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用.请在试剂盒保质前使用。

4.使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

6.洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

7.底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

8.加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

9.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

【人丙酮酸激酶M2型同工酶（M2-PK）ELISA试剂盒】齐一生物供应ELISA试剂盒检测的目的是为实验提供准确可靠的定量分析实验依据。为了保证实验数据的可靠性，在实验过程中必须坚持全面质量控制和全过程质量控制。在收集标本前都必须有一个完整的计划。

操作步骤
实验开始前，请提前配置好所有试剂，试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时，用样品稀释液进行稀释，以使样品符合试剂盒的检测范围。
1.         加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2.         弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl（取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制），37℃,60分钟。
3.         温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。
4.         每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液（同生物素标记抗体工作液） 100μl，37℃，60分钟。
5.         温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。
6.         依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。
7.         依序每孔加终止溶液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.         用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。 在加终止液后15分钟以内进行检测。
【人丙酮酸激酶M2型同工酶（M2-PK）ELISA试剂盒】注：
1. 用户在初次使用试剂盒时，应将各种试剂管离心数分钟，以便试剂集中到管底。
2. 每次实验留一孔作为空白调零孔，该孔不加任何试剂，只是*后加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。
3. 为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜。
4. 未使用完的酶标板或者试剂，请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。
5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。
以上资料仅供您参考，如有问题欢迎来电，齐一生物销售：021－6034 8496；181214 53965；173021 04490

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