关键词: 紫外可见分光光度法; 仲绿原酸;美析仪器www.macylab.com；UV-1100;UV-1200

 

 

 

    目前，测定绿原酸含量的方法很多，常采用毛细管电泳法、HPLC法、可见分光光度法和纸层析-紫外可见分光光度法等。但样品处理均采用索氏回流提取，后经层析分离洗脱等步骤。时间长、效率低。本文采用紫外可见分光光度法测定绿原酸含量，只需超声波提取一小时。不经分离纯化而直接测定，具有快速准确、稳定性好等特点，适合大批量样品分析测试。

 

    1 材料与方法

紫外可见分光光度计：UV-1100(美析中国)；超声波洗涤器：MS-5000(日本)；甲醇(AR)(湖南师大试剂厂)；绿原酸标样。供试材料杜仲叶于1997年5月采于江垭林场。

 

    2 研究方法

 

    2．1波长的选择

 

    根据绿原酸可溶于水、甲醇的性质．精密称取绿原酸标样10.1mg，用50％甲醇溶液溶解定容至10ml稀释10倍后予800～200nm范围内扫描，以50％甲醇溶液作参比，在325nm处有吸收蜂。另将绿原酸标准液点条样于层析纸上，用水作展开剂展开后，于紫外灯下去掉荧光部分(即绿原酸部分)，其余部分用50％甲醇溶液超声提取l5分钟，以50％甲醇作参比，在800—200nm范围内扫描，在345nm处有吸收峰，故选定345nm、325nm，为测定波长，其绿原酸吸光值为(△A=A325一A345)。

 

    2．2标准曲线的制备

 

    精密称取绿原酸标样适量，用50％的甲醇溶液稀释成每毫升含绿原酸5.05、10.1、15.15、20. 2、30.3、40.4μg的标准溶液，以50％甲醇溶液作参比．在345nm 325nm处测定A345、A325值，求得A(△A=A325—A345)，以样品的浓度C(μg／ml)为横坐标，吸光度△A为纵坐标，绘制A—C标准曲线，求得回归方程为：C=K△A+B，其中K=66.247，B=一0.5808。

 

    2．3样品的测定

 

    精密称取杜仲叶粉0.5000g于6Oml试管中，加入40ml 50％甲醇溶液，放人超声波洗涤器中超声提取15min后过滤。滤渣再加入40ml 50％ 甲醇溶液，超声提取15min，共重复上述操作四次(三个平行)，合并滤液定容至250ml。在紫外可见分光光度计上以50％甲醇为参比，测定A325、A345值，求得绿原酸含量。

 

    3 结果与分析

 

    3.1 测定结果

 

    3．2 稳定性实验

 

    将测定的样品在室温下放置24小时后再测定其吸光值A变化不大，说明在5O％甲醇溶液中稳定。

 

    3．3 回收率实验

 

    将标样配成一定浓度加人已溯样品中．测定其含量，计算回收率。

 

    4 结论

 

    (1)绿原酸在5.05～40.4μg/ml之间，其吸光度△A=A325一A345与浓度呈良好线性关系。

 

    (2)采用紫外可见分光光度计测定杜仲叶中绿原酸含量，其稳定性好、重复性好，回收率为104.2％。此方法简便、快速、准确、稳定，可用于杜仲叶片绿原酸含量的测定。

 

关键词: 紫外可见分光光度法; 仲绿原酸;美析仪器www.macylab.com；UV-1100;UV-1200