紫外分光光度法测中草药中铁的含量的应用方案

摘 要: 对白芍、党参、白术、茵陈、天冬、枸杞子、当归、菟丝子、金银花、桔梗中微量元素铁的含量进行了测定，为进一步研究其药理作用提供基础。中草药消化后配制成溶液，用邻二氮菲作显色剂，使用美析UV-1200型紫外分光光度计在510nm处测定各样品的吸光度（A），求出样品中微量元素铁的含量。结果显示，当归和金银花中铁的含量较丰富，分别为（135.3678±0.1111）μg/g和（125.9364±0.1599）μg/g;桔梗含铁量少，为（3.5109±0.1599）μg/g，10种中草药中铁含量有显著性差异（P<0.05）。结果为使用中草药治疗系统疾病提供了可靠数据，10种中草药在用量范围内Fe含量适合人体每天正常摄入量。

      中草药是我国宝贵的医学财富，研究中草药中的微量元素及其含量，对于认清其药学机理，进一步开发应用域都有重要的现实意义。许多研究表明，微量元素可以直接参与或与其它成分协同作用而影响药效。铁是人体必需的微量元素，其在药物代谢方面起着重要的作用 。铁不仅参与血红蛋白的合成，又是肌红蛋白、细胞色素、过氧化氢酶、过氧化物酶等的组成部分。如果缺铁会造成上述酶或蛋白质合成不足，继而影响氧和二氧化碳的运输以及氧的利用。因此，铁和生命呼吸与细胞的生物氧化过程密切相关，具有重要的生理意义。为了探讨中草药中铁与呼吸系统疾病之间的关系，本文选取10种治疗呼吸系统疾病的中草药采用了分光光度法测定其中铁的含量。

1实验部分
1.1仪器

美析仪器 UV-1200型紫外分光光度计。

1.2试剂

浓HCl，浓HNO3 ；HClO4 ； NH 4 Fe（SO4） 2・12H2O，盐酸羟胺，邻二氮菲，NaAc，均为优纯。

1.3溶液的配制

铁标溶液:10mg/mL:准确称取0.8634g十二水硫酸铁铵，置于烧杯中，用30mL2mol/L HCl溶液溶解后转入1L容量瓶中，用去离子水稀释至刻度，摇匀，然后从中吸取50mL该溶液于500mL容量瓶中，加20mL2mol/LHCl溶液，用去离子水稀释至刻度，摇匀。10%盐酸羟胺水溶液（临用时配制）。

0.15%邻二氮菲水溶液（临用时配制，应用少许盐酸溶解，再用去离子水稀释）。1mol/L NaAc水溶液。

1.4样品及样品处理

1.4.1样品 

白芍、党参、白术、茵陈、天冬、枸杞子、当归、菟丝子、金银花、桔梗，均为市售。

1.4.2样品处理

取烘干后药品捣碎，每一样品称取三份，每份1.0000g于50mL锥形瓶中，加10mL浓HNO3，封口放置过夜。次日加入10mL浓HNO3，5mLHClO4，于电热板上缓慢加热，当剩下2mL左右时再分别加入20mL浓HNO3。5mLHClO4，继续消化至溶液呈无色透明近约剩1mL时，停止加热，用去离子水洗涤杯壁多次，洗液和残液合并，定容于50mL容量瓶中。

1.5铁标准曲线的绘制

准确吸取10mg/mL铁标液，0.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、12.0mL依次加入到50mL容量瓶中，再分别加入1mL10%盐酸羟胺溶液、5mL1mol/L NaAc溶液及2mL0.15%邻二氮菲溶液。每加入一种试剂后都要摇匀，用去离子水稀释至刻度，静置10min后，以0.0铁标溶液为空白，在510nm波长下测量上述各溶液吸光度，然后制作标准曲线。

1.6 样品含量测定

将处理后样品分别取5mL于50mL容量瓶中，依次加入10%盐酸羟胺1mL，1mol/L NaAc5mL溶液及0.15%邻二氮菲2mL。每加入一种试剂后都要摇匀。按仪器工作条件测定各样品吸光度。

2结果与讨论
2.1结果

10种中草药铁的含量测量结果表明，不同中草药中铁的含量有显著差异，当归和金银花中铁含量较高，桔梗铁含量蕞低。产生这种差异的原因，作者认为是各种中草药生长环境和形态结构不同造成的。

2.2讨论

实验选取的这10种中草药都是治疗呼吸系统疾病的常用药物。当归其性甘、辛、苦、温，归肝、心、脾、肺经，具有补血调经、活血止痛、托毒生肌、止咳平喘等功效，当归临床上用于治疗多种疾病，如:血虚面色萎黄、唇甲苍白、头昏目眩、月经不调、经少经闭、痛经、月经过多、崩漏下血及胃肠出血、跌打损伤、瘀血肿痛、头痛、手术后瘀血疼痛、痹痛麻木、中风半身不遂、疮疡痈疽及肌肤痛痒、咳喘、心悸怔忡、失眠健忘、脉结代、黄疸等。金银花为忍冬科半常绿缠绕灌木忍冬或红腺忍冬及其它同属植物的花蕾，或初开的花，具有清热解毒、凉散风热之功效，主要用于外感热病和热毒痈肿。

铁是人体必需的微量金属元素，也是人体内含量蕞高的微量元素，正常成年男性体内含铁量为3～5g，女性稍低。其中65%～80%存在于血红蛋白中，20%～30%以铁蛋白或含铁血黄素形式存在于肝、脾及骨髓中，用于合成血红蛋白，4%构成肌红蛋白，微量构成含铁酶（细胞色素系统、细胞内过氧化物酶和过氧化物氢酶等），是血红蛋白、肌红蛋白、红细胞色素及其它酶系的主要成分，帮助氧的运输，促进脂肪氧化。另外，铁还参与黄嘌呤氧化酶活性中心的构成，催化自由基反应，损伤脱氧核糖核酸（DNA）、蛋白质等大分子。在人体内各元素平衡及相互作用中占有重要地位。铁在生物氧化和呼吸过程中起重要作用，并参与氧和二氧化碳的转运。

人和动物口服或吸入过量铁对人体都会引起毒性及异常变化，但在某些情况下铁对人体有益。铁在人体的正常值为:全血为0.5mg/mL，血清为0.065～0.175mg/mL。铁在体内与感染的关系，多数学者认为许多有关酶的成分、淋巴细胞转化率、吞噬细胞移动、抑制因子、中性粒细胞吞噬功能等均与铁水平有关。缺铁时，影响机体血红蛋白的合成，形成缺铁性贫血，进而使脱氧核糖核酸（DNA）合成减少，抗体的产生受到抑制，淋巴细胞对抗原的反应能力降低，易发生感染。通过对32例小儿支气管肺炎的治疗研究发现小儿支气管肺炎的儿童体内铁含量明显低于健康儿童（P<0.01），因此缺铁时更易感染小儿支气管肺炎。

铁吸收、周转、利用和代谢都受到生物体的严格控制，铁缺乏固然对健康不利，但铁过量对机体造成的危害往往更严重。因此，无论是在日常生活中，还是在临床医学上，都应科学地把握铁的摄入量。测定结果显示，这10种中草药在用量范围内均小于人体每天正常摄入值。因此，利用这10种中草药治疗小儿支气管肺炎，不会因铁过量而导致其它更严重的疾病。本实验通过对10种中草药中铁含量的测定，为临床用药提供了基础。

原创作者：上海美析仪器有限公司