法氏囊抗体检测试剂盒使用说明书

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临床意义

      鸡传染性法氏囊病是由传染性法氏囊病病毒（Infectious bursal disease virus，IBDV）引起鸡的一种急性、高度接触性传染病。本病主要特征是突然发病、病程短、发病率高、病鸡严重萎顿、白色下痢、法氏囊B淋巴细胞损伤、鸡体免疫能力受到抑制，鸡感染后体内会产生特异性抗体。检测特异性法氏囊抗体可作为该病疫苗免疫状况及辅助诊断指标。

       本试剂盒采用法氏囊抗原作固相抗原检测鸡血清中的特异性法氏囊抗体。本试剂灵敏度高，特异性强，重复性好，操作方便快速，可分多次使用。

试剂组成

1.预包被板48T/96T;                             6.样本稀释液（5号液）1支;

2.酶结合物（1号液）1支;                          7. 终止液（6号液）1支;

3.洗涤液（2号液）1支;                             8. 阳性对照品1支;

4.底物（3号液）1支;                                9. 阴性对照品1支;

5.显色剂（4号液）1支;                            10.使用说明书1份;

操作程序

1. 样本稀释：用样本稀释液（5号液）将待检血清按1:100稀释,如5ul血清＋500ul样本稀释液，充分混匀。阴、阳对照不用稀释。

2. 加样反应：样本检测孔每孔分别加已稀释样本血清100ul。同时设阴性、阳性及空白对照各一孔，取阴性、阳性对照各100ul分别加入反应孔内，空白对照孔仅加入100ul样本稀释液（5号液）。37℃避光反应30分钟后甩去孔内液体，每孔加洗涤液（2号液）一滴，立即用蒸馏水注满，静置30秒后甩去，再直接用蒸馏水洗涤四次，甩去，拍干。

3. 加酶反应：除空白对照孔外其余每孔加酶结合物（1号液）二滴，37℃避光反应30分钟后甩去孔内液体，如上洗涤，拍干。

4. 显色反应：加底物（3号液）和显色剂（4号液）各一滴，混匀，37℃下避光显色10分钟。加终止液（6号液）一滴，混匀，终止反应（加终止液后蓝色会变为黄色）。

结果判断

1.肉眼观察：阴性对照接近无色，阳性对照呈明显黄色，表示试验有效。待检孔接近无色表示该标本为阴性，待检孔呈明显黄色表示该标本为阳性。

2.仪器判断：以空白对照调零用酶标仪于450nm（620nm作参比波长）读取O.D值，待检孔O.D值大于阴性对照2.1倍者为阳性。当阴性对照O.D值低于0.05时按0.05计算。

注意事项

1.试剂盒在2-8℃下保存，每次取出时先平衡至室温后使用。滴瓶每次用后一定要将盖拧紧，各瓶盖之间切不可混用。各试剂盒之间不可混用。

2.洗涤时将蒸馏水加满孔内，每次停放三十秒钟后甩去孔内液体。禁用自来水等其它水源。

3.为提高试验的可比性建议使用仪器判读结果，并对阴性对照测复孔以减少误差。

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什么是传染性法氏囊病?

中文名称：传染性法氏囊病英文名称：infectious bursal disease;IBD

定义：由双链RNA病毒科的传染性法氏囊病病毒（IBDV）所引起的一种鸡的急性暴发性传染病。表现为法氏囊淋巴组织和淋巴细胞坏死，发病率及死亡率均高。耐过鸡的法氏囊组织受损，导致免疫抑制，影响其他疫苗的免疫效果，常造成免疫失败。

      法氏囊位于泄殖腔的背侧，也称腔上囊，是禽类特有的免疫器官，在70-80日龄时体积，以后逐渐消退，性成熟时消失。该病引起雏鸡免疫抑制，故对马立克氏病和新城疫疫苗接种的反应能力下降，也使病鸡对球虫、大肠杆菌、腺病毒和沙门氏杆菌更易感，造成养鸡业的巨大损失。病原是双核糖核酸病毒。病毒抵抗力强，对一般酸性消毒药能耐受，碱性消毒药能较快杀灭。
       传染性氏囊病（Infectious bursal disease；IBD）为高度接触性感染。病毒通过被污染的环境、饲料、饮水、垫料、粪便、用具、衣物、昆虫等传播，不经过彻底、有效的隔离，消毒措施很难控制。