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技术文章
多糖的分离纯化、分子修饰及生物活性的研究
点击次数：617 发布时间：2008/11/21 21:34:17
一、实验目的
采用复合酶法及热水法提取百合多糖, 并对得到的多糖进行抗氧
采用复合酶法及热水法提取百合多糖, 并对得到的多糖进行抗氧
化活性的比较研究
二、实验原理
百合多糖溶于水，不溶于醇，即水溶醇沉。再用seveg试剂除去蛋白。
百合多糖溶于水，不溶于醇，即水溶醇沉。再用seveg试剂除去蛋白。
三、试剂与器材
药用百合、纤维素酶R－10（5000－10000U/g）、果胶酶5000U/g、胰酶、Sephadex G-75、紫外、可见分光光度计、荧光分光光度计、高速冷冻离心机、部分收集器。
四、操作方法
1、用热水法提取百合多糖（LBPs）。
2、用复合酶法提取百合多糖。
3、比较百合多糖的提取率
4、检测多糖的生物活性。
（1）对O2-·的抑制作用。
（2）对·OH的抑制作用。
（3）对H2O2诱导的人血红细胞氧化溶血的抑制作用
（4）对人红细胞膜脂质过氧化的抑制作用
5、用Sephadex G-75对粗多糖进行纯化。。
五、关键步骤与注意事项
1、热水法提取多糖需严格控制温度、时间和加水比。
2、复合酶法提取百合多糖时需严格控制加酶量、pH、温度和时间。
3、检测抗氧化活性时需注意各种条件的影响。
4、百合多糖的纯化时需考虑柱的长度和直径，
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