标题高效液相色谱仪分析烟草料液中的几种非挥发性成分实验

1 主要仪器与试剂

美国安捷仑公司1100型高效液相色谱仪，包括 1100泵，HP1100自动进样器，HP1100柱温 箱，HP1 100示差折光检测器，HP Chemstations色谱工作站。 水为石英亚沸蒸馏水并用Milli—Q50（美国Millipore公司）超纯水仪处理，电阻率≥18MG· cm；EDTA钙钠（高效液相色谱专用，Waters公司提供）；蔗糖、葡萄糖、果糖、甘油、丙二醇、木糖醇和甘露醇标准（Fluka公司生产，含量≥99 ）。

1．2 色谱条件

色谱柱为Waters Suger—Park一1钙型阳离子交换柱（6．5mm×300mm）；流动相为0．05g／LEDTA钙钠水溶液，流速为0．5mL／min；柱温85 C；进样量20,uL，在该条件下样品和标样的色谱图。

2．1 实验方法

按待测组分含量，酌情取料液样品适量（O．5—2g）于10mL容量瓶中，加入 lOmg／mL的甘露醇内标物1．OmI ，用水定容到刻度并摇匀，取2mL用4．5tLm滤膜过滤，取20 I 进样分析。

3 结果与讨论

样品分析结果

用本法测定了几种料液中的糖、甘油、丙二醇和木糖醇，料液样品按实验方法，每个样平行测定5次，每次测定取相同样品两份，其中一份加入10mg的糖、甘油、丙二醇和木糖醇标准，另外5份不加，在相同色谱条件下测定，根据加标样品测定值减去未加标样品测定值再除以标准加入量计算回收率。根据5次平行测定结果计算相对标准偏差。结果表明方法RSD在0．68 一0．76 之间，加标回收率在98 一102 之间，结果满意。

4 结论

本方法采用 Waters Sugar—Pak一1钙型阳离子交换柱为固定相，0．05g／L EDTA钙钠水溶液为流动相，示差折光仪为检测器测定料液样品中的糖、甘油、丙二醇和木糖醇；方法一次进样可同时测定料液样品中的蔗糖、葡萄糖、果糖、甘油、丙二醇和木糖醇，且样品前处理步骤非常简单。采用内标法可消除示差折光检查器信号不够稳定造成的误差，使方法测定结果更为准确可靠。总之，本法简便、快速、结果可靠，为所建立发酵法生产甘油过程中质量监控提供了方法。