标题过氧化物酶（POX）染色

实验原理
 　　血细胞中的过氧化物酶（Peroxidase,POX或MPO）能分解试剂中的底物H2O2，释出新生态氧，使无色联苯胺氧化为蓝色联苯胺，后者与亚硝基铁氰化钠结合形成蓝黑色的颗粒，沉着于细胞质中。
实验方法
　　材料：
　　1.1%TMB
　　2.亚硝基铁氰化钠饱和溶液
　　3.1%过氧化氢溶液
　　4.稀过氧化氢溶液
　　5.瑞氏染色液
　　6.新鲜涂片（骨髓或者血片）、染色架、显微镜等
　　方法：
　　1.取0.1%TMB乙醇溶液lml，加亚硝基铁氰化钠饱和溶液10?l，溶液呈淡棕黄色。
　　2.在新鲜干燥的血片上，加混合溶液0.5ml，放置lmin后，再加稀过氧化氢溶液0.7ml，染色6min。
　　3.自来水冲洗，待干，瑞氏染液复染15～20min。
　　4.自来水冲洗，待干，油镜镜检。
实验结果计算
　　细胞质内有蓝黑色颗粒者为阳性。
　　（－）无颗粒沉着；
　　（±）颗粒细小，分布稀疏；
　　（+）颗粒较粗，局灶分布；
　　（++）颗粒粗大，分布较密，占胞质1/2~2/3；
　　（+++）颗粒粗大，呈团块分布，几乎布满胞质；
　　（++++）全部胞质均布满颗粒，可覆盖胞核。
注意事项
　　1.血涂片和骨髓片应该新鲜制作，涂片应该厚薄适宜；
　　2.TMB配置在85%~88%的乙醇溶液中效果较好，勿用90%~95%乙醇，否则细胞表面蛋白质很快凝固，妨碍试剂向胞内渗入而导致染色效果差；
　　3.H2O2需新鲜配置，其浓度与加入量不能随意更改。涂片中粒细胞看不见颗粒，红细胞呈棕色或者绿色，即表示H2O2过浓。若H2O2加于玻片上无气泡，则表示无效；
　　4.染色液pH为5.5；
　　5.试剂应置于低温暗处，防止应光线照射而失效。