ELISA试剂盒常用常识安全性:
不要用嘴引起试剂盒里的任何成份。
避免直接接触连续液和底物A、B,一旦接触到这些液体,请从速用水冲刷。
实难中不要吃喝、抽烟或运用化妆品。
灵敏度:最小的查看浓度小于1号标准品。稀释度的线性。
重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
特异性:不与其它细胞因子反应。
运用前,将全部试剂充沛混匀。
不要使液体发作很多的泡沫,避免加样时参与很多的气泡,发作加样上的过错。
根据待测样品数量加上标准品的数量选择所需的板条数。
ELISA试剂盒每个样品根据自个的数量来定,能运用复孔的尽量做复孔。
参与稀释好后的标准品50ul于反应孔、参与待测样品50ul于反应孔内。
甩去孔内液体,每孔加满洗刷液,振荡30秒,甩去洗刷液,用吸水纸拍干。
每个标准品和空白孔主张做复孔。
当即参与50ul的生物素符号的抗体。
盖上膜板,悄然振荡混匀,37℃温育45分钟。
假如用洗板机洗刷,洗刷次数增加一次。
每孔参与100ul的亲和链酶素-HRP,悄然振荡混匀,37℃温育30分钟。
甩去孔内液体,每孔加满洗刷液,振荡30秒,甩去洗刷液,用吸水纸拍干。
假如用洗板机洗刷,洗刷次数增加一次。
取出酶标板,灵敏参与50ul连续液,参与连续液后应当即测定作用。
在450nm波利益测定各孔的OD值。
ELISA试剂盒每孔参与底物A、B各50ul,悄然振荡混匀,37℃温育5分钟。避免光照。