公司客户订购精子细胞BWW培养基,我司有专业的销售团队为您带去专业的服务.
正常精液是一种混合物,在射精时由睾丸和附睾的分泌物及悬浮其中的精子与前列腺、精囊腺和尿道球腺的分泌物混合而成,最终射出的混合物是一种粘稠的液体。精子分析的方法有很多,其中可通过培养进行检测。
Leagene精子细胞BWW培养基储存液主要由氯化钠、氯化钾、氯化钙、硫酸镁、酚红等组成,不含葡萄糖、丙酮酸钠、BSA等以及抗生素,是一种旨在用于广谱动物和人体精子细胞获能处理的常用营养液。
操作步骤
1、 取干净的精液样本室温放置,使之充分液化。 2、 制备精子细胞(仅供参考,不是必须步骤):
1)、上泳法:取一个无菌的15ml锥底离心管,加入1ml液化的精液,在其上方轻轻加入Earle培养液,45°倾斜试管。轻轻竖立试管,取出最上层的1ml液体。加入8ml增补的Earle培养液稀释,弃上清。加入Earle培养液0.5ml重新悬浮细胞,用于精子密度或功能的评估。
2)、非连续密度梯度法:取一个无菌的锥底离心管,加入Percoll。轻轻加入3ml 40%的Percoll于Percoll液面上,小心操作,不要打乱两种液体的界面。轻轻加入1-2ml精液于梯度溶液上,弃上清。将管底的精子团重新悬浮于的Earle培养液中,离心,弃上清。加入1mlEarle培养液,重新悬浮。
3、 将含有精子细胞的离心管置于37℃含5%CO2、95%空气的细胞培养箱中孵育。如无上述培养箱,可将离心管密封加盖,置于37℃的普通培养箱内孵育。在孵育过程中,大多数活动的精子从精浆中游离到覆盖上面的培养液内。
4、 离心精子悬液,使精子细胞密度接近于10×106/ml,将精子重悬于精子细胞BWW培养基中,并在37℃含5%CO2、95%空气的细胞培养箱内孵育。如无上述培养箱,可将离心管密封加盖,置于37℃的普通培养箱内孵育。在孵育过程中,将试管20°倾斜。
注意事项:
1、 注意无菌操作,尽量避免污染。
2、 如无Earle培养液和增补的Earle培养液,可用精子细胞BWW培养基代替。
3、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。