itraq蛋白质组学检测技术服务 itraq蛋白质组检测技术 itraq蛋白质组

        iTRAQ技术是由美国应用生物系统公司（Applied Biosystems Incorporation，ABI）2004年开发的同位素标记相对和绝对定量（isobaric tags for relative and absolute quantitation，iTRAQ）技术，是一种新的、功能强大的可同时对四种样品进行绝对和相对定量研究的方法，这种方法是建立在iTRAQ试剂的基础上。

iTRAQ技术原理： 
        iTRAQ试剂为可与氨基酸N端及赖氨酸侧链连接的胺标记同重元素（isobaric）。在质谱图中，任何一种iTRAQ试剂标记的不同样本中的同一蛋白质表现为相同的质荷比。
        在串联质谱中，信号离子表现为不同质荷比（114～117）的峰，因此，根据波峰的高度及面积，可以得到蛋白质的定量信息。
iTRAQ试剂结构： 
  iTRAQ试剂是一种小分子同重元素化学物质，包括三部分：
  一端是报告部分 reporter group
  另一端是肽反应部分 peptide reactive group
  中间部分是平衡部分 balance group
其中： reporter group：质量为114Da、115 Da、116 Da、117 Da，因此iTRAQ试剂共四种。
• peptide reactive group：将reporter group与肽N端及赖氨酸侧链连接，几乎可以标记样本中所有蛋白质。
• balance group：质量为31 Da、30 Da、29 Da、28 Da，使得四种iTRAQ试剂分子量均为145 Da，保证iTRAQ标记的同一肽段m/z相同。
 

 
图1 iTRAQ 试剂结构

 
图2 iTRAQ 试剂标记原理

综上：
  4个来源不同的相同蛋白样品在一级质谱上表现相同
  Balance group在二级质谱发生中性丢失
  Reporter group 在二级质谱产生4个报告离子，分别是114、115、116和117
  通过分析报告离子的峰强度比值就可以分析同一个蛋白在不同样品间的表达量比值
操作流程：
 

iTRAQ技术主要特点： 
1.分离能力强、分析范围广
2.定性分析结果可靠，可以同时给出每一个组分的分子量和丰富的结构信息
3.MS具备高灵敏度、检测限低
4.分析时间快，分离效果好
5.自动化程度高
6.iTRAQ技术不仅可发现胞浆蛋白，还有膜蛋白、核蛋白、胞外蛋白
iTRAQ技术可检测出低丰度蛋白、强碱性蛋白、小于10KD或大于200KD的蛋白
iTRAQ技术是由美国应用生物系统公司（Applied Biosystems Incorporation，ABI）2004年开发的同位素标记相对和绝对定量（isobaric tags for relative and absolute quantitation，iTRAQ）技术，是一种新的、功能强大的可同时对四种样品进行绝对和相对定量研究的方法，这种方法是建立在iTRAQ试剂的基础上。

我公司itraq技术平台优势： 
1. 寻找差异表达蛋白，并分析蛋白功能。
2. 定性与定量分析蛋白：分析结果可得出各样品中蛋白名称及蛋白量的比值

iTRAQ技术-样品准备 
1.蛋白运输：24小时内可以4度运输
2.蛋白长期保存：-20度
3.待检测蛋白要求：蛋白量最低50ug，浓度最低要 为5ug/uL 10ul，否则同位素无法标记。
4.蛋白提取试剂要求：使用普通的组织、细胞裂解液即可，切忌不要使用二维电泳试剂提取。

服务内容：

注意事项： 
1. 客户所提供的待测蛋白量最低要求50ug，浓度最低要为5ug/uL，否则同位素无法标记
2. 或者您直接提供组织或细胞，后续操作全部由我们来做
3. itraq服务您只需要提供样本，其他试剂都无需提供