人B细胞活化因子受体ELISA试剂盒

1.  试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。

2.  实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。

3.  标准品稀释液即可视为阴性对照或者空白；预处理后的样本无需稀释，直接取10μL加样即可。

4.  严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5.  所有液体组分使用前充分摇匀。

试剂盒组成

注：标准品用标准品稀释液依次稀释为：80、40、20、10、5、2.5 pg/ml

试剂的准备

 20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

洗板方法

1.  手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。

2.  自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。

人B细胞活化因子受体ELISA试剂盒 操作步骤

1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.  设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

3.  待测样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；

4.  随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.  弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

结果判断

 绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。

试剂盒性能

1.  准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。

2.  灵敏度：最低检测浓度小于1.0pg/ml。

3.  特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4.  重复性：板内、板间变异系数均小于15%。

5.  贮藏：2-8℃，避光防潮保存。

6.  有效期：6个月

人B细胞活化因子受体ELISA试剂盒 灵敏度是什么意思？

根据我司多年来的销售经验，我司了解到客户针对购买Elisa试剂盒时，灵敏度要求非常高。这是为什么呢？为您解析Elisa试剂盒灵敏度。Elisa试剂盒灵敏度高能使产品达到一定的数值，对产品试验有着非常大利益，它能检测到的分析物的最小量，表示检测下限的能力。

相对灵敏度=真阳性/（真阳性+假阴性）×100%

测定方法及表示方法：灵敏度标准品、质控血清、阳性标本稀释终点、血清盘（pannel）及临床标本阳性率。

灵敏度标准品可以从卫生部临检中心购买，质控血清可以从卫生部临检中心购买，也可以自己配制。因为质控血清不一定是原倍血清，或由于片段、亚型、位点等原因，评定试剂盒的灵敏度都带有一定的片面性。

阳性标本稀释终点的方法常用于不同试剂盒的比较，但也有上述的片面性。阳性pannel有些可以从卫生部临检中心购买，如HBsAg阳性pannel，也可以自己配制。临床标本阳性率，是一种粗略的估计，但对临床很实用。