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PI,人胰岛素原ELISA试剂盒

PI,人胰岛素原ELISA试剂盒

  • 价 格: 2300元
  • 型号:
  • 生 产 地:美洲
  • 访问:48次
  • 发布日期:2015/4/8(更新日期:2016/6/14)

劲马免疫学第三方检测中心

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产品展示

“人胰岛素原ELISA试剂盒”全程提供技术支持和购买保障,让您放心购买,安心使用.
  • 详细内容
  • 公司简介
人胰岛素原ELISA试剂盒检测原理
Elisa试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
人胰岛素原ELISA试剂盒样品收集、处理及保存方法
1.  血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.  血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3.  细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.  组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5.  保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
1.     酶标仪(450nm
2.     高精度加样器及枪头:0.5-10uL2-20uL20-200uL200-1000uL
3.     37℃恒温箱
人胰岛素原ELISA试剂盒操作注意事项
1.  试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.  实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3.  标准品稀释液即可视为阴性对照或者空白;预处理后的样本无需稀释,直接取10μL加样即可。
4.  严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.  所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒组成
名称
96孔配置
48孔配置
备注
微孔酶标板
12×8
12×4
标准品(80 pg/ml
0.6mL
0.6mL
按说明书进行稀释
标准品稀释液
6mL
3mL
样本稀释液
6mL
3mL
检测抗体-HRP
10mL
5mL
20×洗涤缓冲液
25mL
15mL
按说明书进行稀释
底物A
6mL
3mL
底物B
6mL
3mL
终止液
6mL
3mL
封板膜
2
2
说明书
1
1
自封袋
1
1
注:标准品用标准品稀释液依次稀释为:8040201052.5 pg/ml
试剂的准备
 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按120稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法
1.  手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。
2.  自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
人胰岛素原ELISA试剂盒操作步骤
1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃
2.  设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL
3.  待测样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL
4.  随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min
5.  弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.  每孔加入底物AB50μL37℃避光孵育15min
7.  每孔加入终止液50μL15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
结果判断
 绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。
试剂盒性能
1.  准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900
2.  灵敏度:最低检测浓度小于1.0pg/ml
3.  特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4.  重复性:板内、板间变异系数均小于15%
5.  贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
6.  有效期:6个月
人胰岛素原ELISA试剂盒免责声明
1.   试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。
2.   严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。

劲马免疫学第三方检测中心隶属上海劲马实验设备有限公司。我司主要从事免疫学、分子生物学和常规生化试剂的研发、销售。并代理销售R&D、BIM、TSZ、Sigma、Amresco 、Omega、Gibco、Pharmacia、HyClone、GIBCO等多个国外知名品牌,致力于为广大高校、科研院所和企事业单位提供优质的科研试剂和完善的技术服务,满足生物化学、分子生物学 、细胞生物学、免疫学等生物科技实验需求。 公司主要代理产品:试剂盒:ELISA试剂盒、检测试剂盒、免疫组化试剂盒、放免试剂盒、分子生物学试剂盒、金标检测试剂盒、Omega试剂盒、细胞凋亡试剂盒、生化试剂盒。各种动物血清:内皮细胞专用血清、HyClone、GIBCO胎牛血清。抗体:进口原装抗体、进口分装抗体、单克隆抗体、多克隆抗体、单标抗体、双标抗体、多标抗体、一抗、二抗;免疫组化抗体、免疫荧光抗体、流式细胞抗体、免疫细胞化学抗体。细胞:原装进口细胞、肿瘤细胞、正常细胞、肿瘤耐药细胞耗材:细胞培养耗材、普通实验耗材。生化试剂:原装进口生化试剂、进口分装生化试剂。 劲马免疫学第三方检测中心立足于生命科学领域,全力打造高品质生物科技产品链和技术服务链,立志成为生命科学研究领域的问题解决专家。
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