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支原体的种类有:Mycoplasma arginin(精氨酸支原体)、Mycoplasma hyosynoviae(猪滑液支原体)、Mycoplasma gateae(猫支原体)、Mycoplasma orale(口腔支原体)、Mycoplasma salivarium(唾液支原体)、Mycoplasma auris(耳支原体)、Mycoplasma cloacale(泄殖腔支原体)、Mycoplasma alkalescens(产碱支原体)、Mycoplasma spermatophilum(嗜精支原体)、Mycoplasma fermentans(发酵支原体)、Mycoplasma hyopneumoniae(猪肺炎支原体)、Mycoplasma edwardii(爱德华氏支原体)、Mycoplasma primatum(类人猿支原体)、Mycoplasma opalescens(乳白色支原体)、Mycoplasma pulmonis(肺支原体)、Mycoplasma collis(希尔氏支原体)、Mycoplasma mobile(运动支原体)等。
支原体对细胞的影响,主要从两方面考虑:一方面是对细胞的直接影响,细胞被支原体污染后,增殖缓慢,部分细胞变圆,从瓶壁上脱落,部分细胞虽然表面变化不十分明显,实际上潜伏着多方面的危险;另一方面,支原体可以通过消耗培养基中的精氨酸,抑制细胞DNA、RNA的合成,降低细胞的抵抗力。总之,支原体感染会对细胞造成的影响是多方面的:包括代谢、免疫或生化特性、生长状况、酶的作用途径、细胞膜的组成、染色体结构、转染效率、以及细胞存活等多方面的改变。
Lonza发光法—MycoAlert支原体检测试剂盒
美国Lonza MycoAlert支原体检测试剂盒是利用支原体酶的这一特定活性,进行选择性的生物化学检测。这些酶的存在提供了一种快速的筛选操作,能灵敏地检测出样本中的支原体污染。这些存活的支原体被溶解,然后释放出来的酶与支原体检测试剂盒中提供的底物发生催化反应,将ADP转化成ATP。通过测量样品中添加底物前后ATP的含量,可以得到一个比率,该比率指示支原体是否存在。如果这些酶不存在,第二次读数相对于第一次读数就没有增加;如果酶与底物进行特异性反应,就会导致ATP含量上升。ATP含量的上升通过生物发光化学反应可以检测到,其公式如下:
Luciferase ATP + Luciferin + O2 —> Oxyluciferin + AMP Mg 2+ + PPi + CO2 + LIGHT
这个反应的发生是在室温(18°C~22°C)进行的,也是荧光素酶反应的最佳温度。
在支原体检测试剂盒的检测原理中,最后通过分光光度计读数,由于发出光的强度与ATP的浓度成线性关系,因此可检测支原体的污染问题。
Lonza支原体检测试剂盒特点:
1.快速--20分钟就可以得到结果。
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