自噬相关蛋白7抗体资料参考
产品名称 自噬相关蛋白7抗体
产品缩写 ATG7
蛋 白 名 autophagy related 7
别 称 GSA7; APG7L; APG7-LIKE
免 疫 原 多肽
来 源 兔
特 异 性 抗人、大鼠、小鼠
克隆类型 多克隆
应 用 WB免疫印迹
成 分 200μg/ml亲和纯化抗体,0.01M PBS,30%甘油。
保存条件 连续使用时4°C存储,保质期六个月;长期存储时建议分装为10ul以上小包装-20°C存储,并避免反复冻融,保质期一年。
背景资料 This gene was identified based on homology to Pichia pastoris GSA7 and Saccharomyces cerevisiae APG7. In the yeast, the protein appears to be required for fusion of peroxisomal and vacuolar membranes. The protein shows homology to the ATP-binding and catalytic sites of the E1 ubiquitin activating enzymes.
自噬相关蛋白7抗体分类
抗体分类:根据重链恒定区的血清学类型,可将抗体分为IgM,IgG,IgA,IgD,IgE五类,它们的重链分别为mu, gamma, alpha, delta, epsilon链。在上述每一类别中,按重链构造上的变异又可分为几个亚类,例如人的IgG可分为IgG1,IgG2,IgG3,IgG4四个亚类。
轻链分为两种类型,kappa链和lambda链,但每种抗体中只存在一种类型的轻链。
二抗:二抗是在其它宿主体内制备的能与一抗或一抗片段结合的抗体,上面通常连有酶或荧光素等标签。由于二抗所具备的优点使得其在免疫学实验中得以应用广泛,如western blot(通过与特异性抗体结合来鉴定蛋白质),ELISA(以耦联有酶的抗体或抗原为标记来检测特异性的蛋白质,尤其是相应的抗原或抗体),免疫组织化学(检测组织中的特异性抗原),免疫细胞化学(通过免疫学方法检测细胞的抗原组成),流式细胞术(通过检测激光所激发荧光来鉴定分离不同类型的细胞)及免疫沉淀(通过抗原与抗体的特异性结合作用来分离相应抗原)。二抗针对某一特定物种(如小鼠)的所有抗体均具有特异性,因而使用标记的二抗可以免去对每一个一抗进行标记,大大节省了时间和费用;此外,一个一抗分子可以同时结合几个二抗分子,从而使信号大大增强,提高了实验灵敏度。
二抗可以耦联有几种不同的标记,可以是酶,荧光素,或生物素。
其他抗体保存方法
带标记的抗体
带标记的抗体一般储存在黑色容器中或者用锡箔纸盖住。
酶标记抗体
碱性磷酸酶和其他酶结合物对于冷冻特别敏感,一般应在4°C短期存储。
标记抗体长期保存最好是在终浓度为50%的甘油或乙二醇中于-20°C保存。虽然某些酶结合物可在无保护剂的情况下于-20°C储存,但必须分装,以防止反复冻融。
荧光标记抗体
荧光遇光容易分解,荧光标记的试剂(不只是抗体)必须避光保存,其应该存放在4°C、避免让其凝固。
自噬相关蛋白7抗体参考效价选择
Flow Cytometry:1:40-80
Western blotting:1:100-400
Immunocytochemistry in fixed cells:1:50-200
enzyme-linked immuno sorbent assay:1:2000
Immunohistochemistry in paraffin section:1:50-200
如何选择二抗
通常情况下,某一特定的实验中可能同时有几种二抗可供选择,如何能选择到最适合该实验的二抗,需要综合以下几个方面进行考虑:
一抗的物种来源
一抗是在什么物种来源的,相应的二抗也要是抗该物种的抗体。例如,如果一抗是在小鼠体内制备的,那么你就应当选择抗小鼠的二抗,如果一抗是在兔体内制备的,那么二抗就应当是抗兔的抗体。至于二抗本身是在什么动物中制备的对二抗的质量并无明显的影响。
一抗是属于哪个类或亚类
二抗需与一抗的类别或亚类相匹配。这通常是针对单克隆抗体而言。多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白,因此相应的二抗就是抗IgG抗体。
单克隆抗体的类别及亚类通常会在产品列表中列出,如果你的一抗是小鼠IgM,那么相应的二抗就应当是抗小鼠IgM,或是抗小鼠IgG抗体。
如果单克隆一抗是小鼠IgG的某一亚类(IgG1,IgG2a,IgG2b,IgG3),那么几乎所有的抗小鼠IgG都可以与之结合,或者你也可以选择专门针对这一亚类的二抗,例如,如果你的一抗是小鼠IgG1,那么你可以选择抗IgG1的二抗,此种抗体在双标记实验中尤其适合。
如果你不知道一抗是哪一类别或亚类,那么抗小鼠IgG是一个不错的选择,因为此种抗体可以识别大多数类型的IgG免疫球蛋白。
如何分装自噬相关蛋白7抗体
请根据一次实验的常用量进行分装。每等份不应少于 10 µl;每等份的量越少,抗体储液浓度受蒸发和管壁吸附的影响越大。