氢钾ATP酶通道蛋白抗体资料参考
产品名称 氢钾ATP酶通道蛋白抗体
产品缩写 ATP4B/H+K+ATPase
蛋 白 名 Potassium-transporting ATPase subunit beta
别 称 ATP6B
免 疫 原 多肽
来 源 兔
特 异 性 抗人、大鼠、小鼠
克隆类型 多克隆
应 用 IH(P)免疫组化(石蜡);IH(F)免疫组化(冰冻);IC细胞免疫化学;WB免疫印迹
成 分 200μg/ml亲和纯化抗体,0.01M PBS,30%甘油。
保存条件 连续使用时4°C存储,保质期六个月;长期存储时建议分装为10ul以上小包装-20°C存储,并避免反复冻融,保质期一年。
背景资料 The protein encoded by this gene belongs to a family of P-type cation-transporting ATPases. The gastric H+, K+-ATPase is a heterodimer consisting of a high molecular weight catalytic alpha subunit and a smaller but heavily glycosylated beta subunit. This enzyme is a proton pump that catalyzes the hydrolysis of ATP coupled with the exchange of H(+) and K(+) ions across the plasma membrane. It is also responsible for gastric acid secretion. This gene encodes the beta subunit of the gastric H+, K+-ATPase.
氢钾ATP酶通道蛋白抗体分类
抗体分类:根据重链恒定区的血清学类型,可将抗体分为IgM,IgG,IgA,IgD,IgE五类,它们的重链分别为mu, gamma, alpha, delta, epsilon链。在上述每一类别中,按重链构造上的变异又可分为几个亚类,例如人的IgG可分为IgG1,IgG2,IgG3,IgG4四个亚类。
轻链分为两种类型,kappa链和lambda链,但每种抗体中只存在一种类型的轻链。
二抗:二抗是在其它宿主体内制备的能与一抗或一抗片段结合的抗体,上面通常连有酶或荧光素等标签。由于二抗所具备的优点使得其在免疫学实验中得以应用广泛,如western blot(通过与特异性抗体结合来鉴定蛋白质),ELISA(以耦联有酶的抗体或抗原为标记来检测特异性的蛋白质,尤其是相应的抗原或抗体),免疫组织化学(检测组织中的特异性抗原),免疫细胞化学(通过免疫学方法检测细胞的抗原组成),流式细胞术(通过检测激光所激发荧光来鉴定分离不同类型的细胞)及免疫沉淀(通过抗原与抗体的特异性结合作用来分离相应抗原)。二抗针对某一特定物种(如小鼠)的所有抗体均具有特异性,因而使用标记的二抗可以免去对每一个一抗进行标记,大大节省了时间和费用;此外,一个一抗分子可以同时结合几个二抗分子,从而使信号大大增强,提高了实验灵敏度。
二抗可以耦联有几种不同的标记,可以是酶,荧光素,或生物素。
其他抗体保存方法
带标记的抗体
带标记的抗体一般储存在黑色容器中或者用锡箔纸盖住。
酶标记抗体
碱性磷酸酶和其他酶结合物对于冷冻特别敏感,一般应在4°C短期存储。
标记抗体长期保存最好是在终浓度为50%的甘油或乙二醇中于-20°C保存。虽然某些酶结合物可在无保护剂的情况下于-20°C储存,但必须分装,以防止反复冻融。
荧光标记抗体
荧光遇光容易分解,荧光标记的试剂(不只是抗体)必须避光保存,其应该存放在4°C、避免让其凝固。
氢钾ATP酶通道蛋白抗体参考效价选择
Flow Cytometry:1:40-80
Western blotting:1:100-400
Immunocytochemistry in fixed cells:1:50-200
enzyme-linked immuno sorbent assay:1:2000
Immunohistochemistry in paraffin section:1:50-200
如何选择二抗
通常情况下,某一特定的实验中可能同时有几种二抗可供选择,如何能选择到最适合该实验的二抗,需要综合以下几个方面进行考虑:
一抗的物种来源
一抗是在什么物种来源的,相应的二抗也要是抗该物种的抗体。例如,如果一抗是在小鼠体内制备的,那么你就应当选择抗小鼠的二抗,如果一抗是在兔体内制备的,那么二抗就应当是抗兔的抗体。至于二抗本身是在什么动物中制备的对二抗的质量并无明显的影响。
一抗是属于哪个类或亚类
二抗需与一抗的类别或亚类相匹配。这通常是针对单克隆抗体而言。多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白,因此相应的二抗就是抗IgG抗体。
单克隆抗体的类别及亚类通常会在产品列表中列出,如果你的一抗是小鼠IgM,那么相应的二抗就应当是抗小鼠IgM,或是抗小鼠IgG抗体。
如果单克隆一抗是小鼠IgG的某一亚类(IgG1,IgG2a,IgG2b,IgG3),那么几乎所有的抗小鼠IgG都可以与之结合,或者你也可以选择专门针对这一亚类的二抗,例如,如果你的一抗是小鼠IgG1,那么你可以选择抗IgG1的二抗,此种抗体在双标记实验中尤其适合。
如果你不知道一抗是哪一类别或亚类,那么抗小鼠IgG是一个不错的选择,因为此种抗体可以识别大多数类型的IgG免疫球蛋白。
如何分装氢钾ATP酶通道蛋白抗体
请根据一次实验的常用量进行分装。每等份不应少于 10 µl;每等份的量越少,抗体储液浓度受蒸发和管壁吸附的影响越大。
抗体定义:
1:能与相应抗原(表位)特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。
2:在人和动物体内,由于抗原或半抗原入侵刺激机体而在细胞中产生的免疫球蛋白。能可逆、非共价、特异地与相应抗原结合,形成抗原-抗体复合体。
3:机体内B细胞在抗原刺激下所产生的具特异性免疫功能的球蛋白。
4:具有抗原结合部位,能与抗原分子上相应表位发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。
核心抗体检测原理:
试剂盒采用竞争抑制法原理,检测人血清或血浆中的乙型肝炎病毒核心抗体。将样品加入包被有乙型肝炎核心抗原(HBcAg)的包被反应板微孔中, 并同时加入辣根过氧化物酶标记的抗-HBc, 经过孵育,如样品中含有抗-HBc,则样品中的抗-HBc与辣根过氧化物酶标记的抗-HBc竞争的与包被于微孔中的HBcAg结合,洗去游离反应物。加入显色剂后,样品显色OD值小于或等于阈值判定为抗-HBc阳性,显色OD值大于阈值判定为抗-HBc阴性。