一、“人雌二醇ELISA试剂盒”参数规格
保存条件:2-8℃低温保存
保质期:6个月,所有试剂盒均提供最新批次。
试剂盒成分:酶标板,试剂,标准品等。
二、“人雌二醇ELISA试剂盒”选型
产品规格:96T/48T
96T指可以做94个标本-2个标准对照-84个样本
48T指可以做47个标本-1个标准对照-42个样本
三、Elisa试剂盒实验原理
ELISA是以免疫学反应为基础,将抗原、牽9体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中,通过不同的设计,具体的方法步骤可有多种。即:用于检测抗体的间接法(图a)、用于检测抗原的双抗体夹心法(图b)以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。比较常用的是ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法。
四、产品优势体现
Elisa技术在上述方面表现出如下优越性:
(一)灵敏度高
虽然酶活性调节Elisa方法的灵敏度目前并不十分理想,但在酶活性放大Elisa中,检测的灵敏度远比RIA高。根据质量作用定律。即免疫反应所形成的免疫复合物量与反应物浓度成正比。推测所检测的待测物分子数为1。已知1个摩尔浓度含6.02×1023个分子,那么理论推测酶活性放大Elisa方法的最低检测限可达1.7×10-24mol/L。虽然在实际应用中由于反应条件和试剂纯度以及仪器精度等因素的影响,往往达不到这个水平(大于104个分子),但表明Elisa在灵敏度方面的改进潜力是很大的。
(二)特异性强
从免疫反应的角度来说,Elisa与RIA的特异性应该是一致的。但在Elisa方法中,由于作用检测指示剂的酶与其底物的反应有专一性,从而增加了该方法的特异性。
(三)对仪器设备要求不高,测定成本低
Elisa测定在普通实验室便可进行,常用的仪器设备包括加样器、培养箱、酶标专用读数器等。按现有价格折算,酶标仪的价格只及液闪仪的1/6至1/4,因此每测定一个样本所需成本不及PIA的1/10至1/16。某些定性Elisa方法,还可在野外进行,操作十分方便。
(四)方法快速、简便
均质酶免疫测定方法操作时,所有反应试剂均在同一体系内进行,不需任何分离步骤,操作十分简便、快速,数分钟便能得出结果。某些定性Elisa试剂盒,如国外生产的某些奶牛发情鉴定和妊娠诊断Elisa试剂盒,数分钟时间便能完成一次测定。
(五)试剂保存时间较长
作为检测指示剂用的酶和酶标记物,在低温或干燥条件下相对稳定,可保存半年至数年之久。
(六)自动化程度高
Elisa由于不存在放射性同位素污染,因此,除加待测样本需要人工操作外,其他各步骤均可用仪器自动化完成。在这种自动化条件下,平均每人每天可完成2000余个样本的检测工作。
(七)方法种类多
Elisa技术可以充分利用单克隆抗体的优点,并能利用某些非免疫反应试剂(如SPA、凝集素等)的作用,发展成为许多新方法。此外,发展Elisa技术还可以从酶及其底物两方面着手。这是因为:第一,用于Elisa技术的酶其种类远远多于可用作RIA检测指示剂的放射性同位素。生物界的酶多种多样,有希望开发很多类型的酶用于Elisa,并建立相应的Elisa方法。相反,自然界的化学元素是有限的,放射性同位素的种类更加有限。第二,由于酶的多样性,酶作用底物也有多种多样,与此相对应的生色源或供氢体的种类也有远大的开发和发展潜力。
(八)无放射性同位素污染
Elisa技术应用酶促反应作为检测免疫反应强度的依据,在终端测定中毋须接触放射性同位素,根本不存在放射性污染问题(某些为提高检测灵敏度而建立的酶免疫放射底物方法除外)。
鉴于Elisa技术与RIA技术相比具有以上8个方面的优越性,尤其在污染和操作简便性方面,Elisa技术所具有的长处有利于该项技术在生产和临床实践中推广应用。统计资料表明,尽管RIA技术比Elisa技术早5年诞生,但在生产实践中的应用还不及Elisa技术普及。国际原子能机构在推广应用核技术的同时,也在推广非放射性同位素标记技术,以缩小“核扩散”范围。预计在将来,Elisa技术有逐渐取代RIA技术的趋势。
五、“人雌二醇ELISA试剂盒”注意事项
1. 当混合蛋白溶液时应尽量轻缓,避免起泡。
2. 洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。
3. 一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。
5. 如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请最后乘以稀释倍数。
6. 在配制标准品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。
7. 底物请避光保存。