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T4 DNA连接酶代理商,9015-85-4

价格：电议
型号：
生产地：美洲
访问：152次
发布日期：2015/6/7(更新日期：2015/6/7)

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进口“T4 DNA连接酶”新品8折优惠销售！氨基酸、碳水化合物、植物激素、血清、白介素试剂盒低价出售！需要此产品客户，欢迎您来电咨询。

详细内容
公司简介

“T4 DNA连接酶”资料概述：

英文名称：T4 DNA Ligase

CAS号：9015-85-4

分子量：55.3kDa，单体

级别： BR

来源：含有T4噬菌体克隆基因30的大肠杆菌

浓度：30Weiss u/ul(6000CEU/ul）

活性定义：是指在ATP-PPi交换反应中，37℃、30分钟内将1nmol [32PPi]转换为Norit可吸收形式所需的酶量（weiss单位，1个weiss单位相当于约200个粘性末端连接单位。1个粘性末端连接单位：20ul反应体系（50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 25ug/ml BSA, 12uM(300ug/ml)的5-DNA末端）中，在16℃、30分钟内连接50%连接HindIII酶切的Lambda DNA 产物所需的酶量）

酶活性分析混合物：66mM Tris-HCL(PH7.6), 10mM DTT, 6.6mM MgCL2, 0.066mM ATP, 3.3uM[32PPi]

保存液组分：20mM Tris-HCL(PH7.5), 50mM KC1, 1mM DTT，0.1mM EDTA和50%(v/v)甘油

10×T4 DNA Ligase缓冲液（#B69）：400mM Tris-HCL, 100mM MgCL2, 100mM DTT, 5mM ATP(PH7.5,25℃)

抑制剂：当反应体系中NaC1或KC1的浓度超过200 mM时，可强烈抑制T4 DNA Ligase活性

失活：65℃加热10分钟或70℃加热5分钟

注意：T4 DNA Ligase与DNA结合会改变条带的琼脂糖凝胶电泳迁移率，为避免此现象，电泳前需处理样本或分子量标准。样本处理如下：样本与Fermentas公司6×DNA Loading Dye&SDS溶液（#R1151）混合，75℃加热5分钟或65℃加热10分钟后冰浴保存；转化时，连接产物的体积不得超过感受态细胞体积中的10%；电转化之前，先用lvfang抽提方法除去连接混合物中的T4 DNA Ligase，然后经乙醇沉淀纯化抽提产物

质量控制：测试表明无内切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。功能检测：粘性末端或平末端DNA的连接能力

性状：液体。该酶催化双链DNA或RNA中毗邻的5＇磷酸基团和3＇-羟基末端之间形成磷酸二酯键，还可以修复双链DNA、RNA或DNA/RNA复合体中的单链切口，连接DNA的粘性和平末端，但该酶对单链核酸无酶活性。该酶需要辅因子ATP

用途：生化研究。粘性末端或平末端双链DNA的连接；双链寡核苷酸接头与双链DNA连接；双链DNA、RNA或DNA-RNA复合体中缺口的修复；连接酶介导的RNA检测；位点特异性突变；扩增片段长度多态性

保存： -20°C

化学试剂性能评价方法
1. 稳定性：连续观测，每日试验；热加速试验。
2. 反应灵敏度：直接计算单位浓度反应物的吸光度变化或变化率。
3. 精密度：按照NCCLS EP5-A进行。
4. 准确度：按照NCCLS EP9-A2 进行。
5. 线性范围：按照NCCLS EP6-A 进行。
6. 基质效应：通过回收试验确定
7. 抗干扰性：按照NCCLS EP7-A进行。
接触“T4 DNA连接酶”注意事项：
健康危害：吞咽有害。造成皮肤刺激。造成严重眼刺激。可能引起呼吸道刺激。
侵入途径：经口、经皮、吸入
急救措施：
1）皮肤接触：立即脱去污染的衣着，用大量流动清水冲洗 20～30 分钟。如有不适感，就医。
2）眼睛接触：立即提起眼睑，用大量流动清水或生理盐水彻底冲洗10～15分钟。如有不适感，就医。
3）吸入：迅速脱离现场至空气新鲜处。保持呼吸道通畅。如呼吸困难，给输氧。呼吸、心跳停止，立即进行心肺复苏术。
就医。
4）食入：饮水，禁止催吐。如有不适感，就医。
5）T4 DNA连接酶的保管
1 化学试剂的保管应视其性质而定
　　一般试剂可保存在玻璃瓶内; 对玻璃有强烈腐蚀作用的试剂，如氢氟酸、氢氧化钠应保存在聚乙烯塑料瓶内; 易被空气氧化、分化、潮解的试剂应密封保存;易感光分解的试剂应用有色玻璃瓶贮存并藏于暗处; 易受热分解及低沸点溶剂，应存于冷处; 剧毒试剂应存于保险箱; 有放射性的试剂应存于铅罐中。
2做好化学试剂的经常性保养工作
　　如果化学试剂保管不当，就会失效变质，影响实验的效果，并造成物质的浪费，甚至有时还会发生事故。因此，科学地保管好试剂对于保证实验顺利进行，获得可靠的实验数据具有非常重要的意义。化学试剂的变质，大多数情况是因为受外界条件的影响，如空气中的氧气、二氧化碳、水蒸气、空气中的酸碱性物质以及环境温度、光照等，都可使化学试剂发生氧化、还原、潮解、风化、析晶、稀释、锈蚀、分解、挥发、升华、聚合、发霉、变色以及燃爆等变化。经常检查储存中的化学试剂的存放状况发现实际起过的储存期或变质应及时报告，并按规定妥善处理 ( 降级使用或报废) 和销帐。在正常储存条件下，一般化学试剂贮有不宜超过2年，基准试剂不超1年。
　　为了避免环境和其他因素的干扰，所有化学试剂一经取出不得放回贮有容器: 属于必须回收的试剂或指定、退库、的试剂，必须另设专用容器回收或贮存，具有吸潮性或易氧化，易变质的化学试试剂必须密封保存，避免吸湿解，氧化或变质。定期盘点，核对出现差错应及时检查原因，并报主管领导或部门处理。
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