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大鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒操作说明
一、目的
本操作说明旨在介绍大鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒的使用方法,以确保实验结果的准确性和可靠性。
二、原理
ELISA(酶联免疫吸附试验)是一种基于抗原-抗体反应的免疫分析方法。本试剂盒采用双抗体夹心法,通过特异性抗体与样本中的TGF-β1结合,再与酶标抗体结合,形成酶标抗体-抗原-特异性抗体的复合物。后加入底物,根据颜色反应的强度,可定量测定样本中的TGF-β1浓度。
三、操作步骤
1. 准备工作
(1)试剂盒及所需试剂:大鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒、洗涤液、底物溶液、终止液。
(2)实验器材:酶标板、酶标仪、移液器、吸头、洗涤器。
(3)样本:大鼠血清或组织匀浆液。
2. 加样
(1)在酶标板的适当位置设置标准品孔和样本孔,分别加入标准品和样本,轻轻摇晃酶标板,使溶液充分混匀。
(2)加入酶标抗体至每个孔中,轻轻摇晃酶标板,使溶液充分混匀。
(3)加入底物溶液至每个孔中,轻轻摇晃酶标板,使溶液充分混匀。
(4)加入终止液至每个孔中,轻轻摇晃酶标板,使溶液充分混匀。
3. 酶标仪检测
将酶标板放入酶标仪中,按照酶标仪的操作说明书进行设置和检测,读取各孔的吸光度值。
四、结果分析
根据标准品浓度与吸光度值绘制标准曲线,根据样本吸光度值在标准曲线上查找对应的浓度值,即为样本中TGF-β1的浓度。
五、注意事项
1. 操作过程中要保持清洁,避免污染。
2. 严格按照试剂盒说明书进行操作,不要随意更改操作步骤或试剂用量。
3. 在检测要确保试剂的有效性,并避免使用过期的试剂。
4. 如果发现异常结果或对结果有疑问,应重新进行实验或向供应商咨询。
六、贮存与保存
1. 试剂盒应存放在2-8℃的冰箱中,避免冷冻和阳光直射。
2. 未开封的试剂盒应按照说明书上的有效期进行保存和使用。
3. 过期或开封后的试剂盒应按照供应商的建议进行处理。
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