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TNF-α,猪肿瘤坏死因子αELISA试剂盒

TNF-α,猪肿瘤坏死因子αELISA试剂盒

  • 价 格: 2200元
  • 型号:
  • 生 产 地:美洲
  • 访问:159次
  • 发布日期:2015/7/2(更新日期:2015/7/2)

劲马免疫学第三方检测中心

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【猪肿瘤坏死因子αELISA试剂盒价格】:(含税含运费,我们全程提供ELISA实验技术指导和ELISA试剂盒免费代测)
  • 详细内容
  • 公司简介
一、猪肿瘤坏死因子αELISA试剂盒参数规格
试剂盒种属齐全|代测ELISA
有效期:2-8℃,六个月。
规格:48T 96T可以提供定量和定性。
最低检测限:欢迎QQ或电话或邮箱索取原版说明书
ELISA试剂盒库存充足,送货及时
1质量绝对保证,有质量问题无条件免费包换
2提供免费代测服务
3提供全程技术指导
4可先提供发票合同,公司三证一同寄给您。
二、工作原理
用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗体的微孔中依次加入标本或者标准品、生物素化的抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物显色。底物在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品浓度呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定OD值,计算样品浓度。
三、测定抗体方面:所用的方法称为间接法,也是目前最常用的方法
间接法首先用抗原包被于固相载体,这些包被的抗原必须是可溶性的,或者至少是极微小的颗粒,经洗涤,加入含有被测抗体之标本,再经孵育洗涤后,加入酶标记抗抗体,(对人的标本来说即加酶标抗人球蛋白IgG、IgM),再经孵育洗涤后,加底物显色,底物降解的量,即为欲测抗体的量,其结果可用目测或用分光光度计定量测定,本法用不同种抗原包被固相载体后,只要用一种酶标记抗人球蛋白,即可作多种人的传染病、寄生虫病以及其他疾病的血清学诊断。如用酶标记抗人IgM,则可用于早期诊断。

四、猪肿瘤坏死因子αELISA试剂盒的影响因素
Elisa试剂盒的测定,受很多方面影响,这也是ELISA检测中的重要部分,可从以下一个方面加以说明。
试验的重复性(精确度),有二种方法来检验试验的精确度:通常用变异系数来表示:1、几个样品用ELISA法同时进行多次测定求出CV%;2、不同时间对不同操作者对某几个样进行多次测定求出变异系数。CV是个体参数标准差与平均数的比率。
S / X = CV ,CV应低10%,不应大于10~15%。
不论目测或分光光度计测定,均可作一个稀释度或一系列稀释度测定,一般常规诊断只用一个稀释度判断阳性或阴性就可以了,这样比较方便,现在推荐传染病的血清诊断用1:200一个稀释度。有些需要精确定量的,可作一系列稀释度测定。
记录结果有下列几种方法:
1、“+”或“-”:所有超过规定的O.D值(如O.D,0.4)的标本均属阳性,此规定O.D值是根据事先测定大量阴性标本所取得的,此规定值是阴性标本的上限。或者以一组阴性标本O.D平均值加2~3个标准差作为阳性阈值。
2、直接以O.D值来表示,如0.4、0.7、1.2,O.D值越大,阳性反应越强,但此数值是在固定实验条件下得到的结果,而且每次实验都要有参考标本作对照。
3、以终点滴度表示:将标本作连续稀释,最高稀释度能出现阳性反应者(即OD值仍大于阳性阈值,即为该标本的滴度。
4、以“比值”表示:求出被检标本的O.D值与一组阴性标本O.D值的比值,例如为阴性标本的2倍或3倍,即为阳性,比值小于2.1而大于1.5为可疑,<1.5为阴性。
如在此测定时以空白校正“O”点。
以“单位”来表示:在测定被检标本的同时,再测定一个含已知单位数的阳性参考血清,用不同稀释度作ELISA检测后,以O.D值为纵坐标,单位数为横坐标,画出标准曲线。以后可根据被检标本的O.D值,从曲线上找出相应的单位数,再乘于血清的稀释倍数,即可得出被检标本的单位数。
作试验时的阴性参考血清最好不要显色,否则会对结果判断带来困难,特别在目测时,当阳性标本O.D值>2.0时,应作适当稀释后再作测定。
五、猪肿瘤坏死因子αELISA试剂盒的基本原理有三条:
(1)抗原或抗体能以物理性地吸附于固相载体表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面间的疏水性部分相互吸附,并保持其免疫学活性;
(2)抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物,而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性;
(3)酶结合物与相应抗原或抗体结合后,可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在,而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的,因此,可以按底物显色的程度显示试验结果。
由于ELISA法一方面是建立在抗原与抗体免疫学反应的基础上,因而,具有特异性。而另一方面又由于酶标记抗原或抗体是酶分子与抗原或抗体分子的结合物,它可以催化底物分子发生反应,产生放大作用,正因为此种放大作用而使本法具有很高的敏感性。因此,ELISA法是一种既敏感又特异的方法。
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