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MPO,猪髓过氧化物酶ELISA试剂盒

MPO,猪髓过氧化物酶ELISA试剂盒

  • 价 格: 2500元
  • 型号:
  • 生 产 地:美洲
  • 访问:52次
  • 发布日期:2015/7/2(更新日期:2015/7/2)

劲马免疫学第三方检测中心

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【猪髓过氧化物酶ELISA试剂盒样本储存】:收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存在4℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本,将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时,-20℃可保存1个月。-70℃可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。
  • 详细内容
  • 公司简介
一、猪髓过氧化物酶ELISA试剂盒参数规格
保存条件:2-8℃低温保存
保质期:6个月,所有试剂盒均提供最新批次。
试剂盒成分:酶标板,试剂,标准品等。
二、间接法是检测抗体最常用的方法,其原理为利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体,故称为间接法。操作步骤如下:
(1)将特异性抗原与固相载体连接,形成固相抗原:洗涤除去未结合的抗原及杂质。
(2)加稀释的受检血清:其中的特异抗体与抗原结合,形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后,固相载体上只留下特异性抗体。其他免疫球蛋白及血清中的杂质由于不能与固相抗原结合,在洗涤过程中被洗去。
(3)加酶标抗抗体:与固相复合物中的抗体结合,从而使该抗体问接地标记上酶。洗涤后,固相载体上的酶量就代表特异性抗体的量。例如欲测人对某种疾病的抗体,可用酶标羊抗人IgG抗体。
(4)加底物显色:颜色深度代表标本中受检抗体的量。
本法只要更换不同的固相抗原,可以用一种酶标抗抗体检测各种与抗原相应的抗体。

三、标本要求 
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
3.组织处理:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
四、判定猪髓过氧化物酶ELISA试剂盒结果计算
对于新入行不久,对ELISA的结果分析这块不太熟悉。客户的实验是通过人源的蛋白作为抗原,兔源多克隆抗体作为一抗(我们就是为了通过做ELISA来检测其效价),然后通过辣根过氧化物作为二抗及显色组分。实验做完了,但不知道怎么分析结果,例如标准曲线怎么做之类的。另外,还想问一下,有没有实用的软件可用来分析。对于客户的问题回答:
间接ELISA要是试剂盒,会有标准品的,把标准品按一定浓度梯度稀释一块儿做(一般有三个重复),最后酶标仪或分光光度计比色,用软件(oringe)绘制标准曲线,的出公式,按公式将样品带入公式,
用于ELISA结果计算最方便的是logit曲线。曲线的横坐标用标样各浓度(ng/ml 或其他单位)的自然对数表示,纵坐标用各浓度显色值的logit值表示。Logit值的计算方法如下:
B/B0 B
Logit(B/B0)=ln———— =ln————
1-B/B0 B0-B
其中B0是0ng/ml孔的显色值,B是其它浓度的显色值。
五、猪髓过氧化物酶ELISA试剂盒所需要样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右 (2000-3000转/分)去除颗粒。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清 。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
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