1、切碎洗净的新鲜番茄,放入三角瓶,置4℃冰箱8—12h,取出后用纱布过滤。称取改良番茄汁琼脂培养基基础60g,加入950 ml蒸馏水或去离子水和50ml番茄汁,搅拌加热煮沸至完全溶解,校正pH后分装三角瓶,121℃高压灭菌15min。
2、无菌操作将经过充分摇匀的检样25g(或25mL),放入含有225mL灭菌生理盐水的灭菌广口瓶内,振摇均匀,即为1:10稀释液,依次做1:100、1:1000……稀释。
2、 选择菌落数在30—300个之间的平皿进行计数。计算后,随机挑取5个菌落数进行革兰氏染色,显微镜检查并做过氧化氢酶试验。革兰氏阳性,过氧化氢酶阴性,无芽孢的球菌或杆菌可定为乳酸菌。根据证实为乳酸菌落计算出该皿内的乳酸数,然后乘其稀释倍数即得每毫升样品中乳酸菌数。
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