上海笃玛生物科技有限公司人胚肾细胞供应原代培养及其操作步骤:原代分离细胞培养是指从供体内取出组织后,经机械以及消化分离成单个细胞或单一型细胞群,使之在体外模拟人体生理环境,在无菌、适当温度和一定的营养条件下,生存、生长和繁殖。原代培养细胞常有不同的细胞成分,生长缓慢,但是更能代表所来源的组织细胞类型和表达组织的特异性特征。利用原代细胞培养做各种实验,如药物测试、细胞分化及病毒学方面的试验效果很好。
产品名称:人胚肾细胞
产品用途:科研
保证运输中细胞的正常生长,关于其价格、报价、货期,请咨询我们。
产品特点:活性好、存活率高、实验成果特征明显
产品来源:人组织、小鼠组织、大鼠组织、兔组织等动物组织
产品运输:免费快递
产品包装:瓶装
产品用途:细胞培养研究
其操作
人胚肾细胞步骤如下。
1.剪切组织 先将所取得的组织,用D-Hanks或Hanks液清洗,以去除表面血污,并用手术镊去除黏附的结缔组织等非培养所需组织。再次清洗后,用手术刀将组织切成若干小块,移入青霉素小瓶或小烧杯中,加入适量缓冲液,用弯头眼科剪,反复剪切组织,直到组织成糊状,约1mm3大小。静置片刻后,用吸管吸去上层液体,加入适当的缓冲液再清洗一次。
2.消化分离 消化分离的目的是将细小的组织块消化分离成细胞团或分散的单个细胞,以利于进一步的培养,常用的消化酶有胰蛋白酶和胶原酶。
3.培养 细胞悬液用计数板进行细胞计数。用培养液将细胞数调整为(2~5)×105 cells/ml,或实验所需密度,分装于培养瓶中,使细胞悬液的量以覆盖后略高于培养瓶底部为宜。置CO2培养箱内,5%CO2,37℃静置培养。一般3~5d,原代培养细胞可以黏附于瓶壁,并伸展开始生长,可补加原培养液量1/2的新培养液,继续培养2~3d后换液,一般7~14d可以长满瓶壁,进行传代。
4.注意事项
(1)无菌操作:细菌或霉菌污染是培养失败的常见原因,必须加强各个环节的无菌操作观念,以预防为主,一旦污染,一般很难消除。
(2)培养液:所用的培养液必须满足细胞生存和生长的必要条件。由于细胞来源的动物种类、组织类型不同,对培养液的要求有一定的差异,必要时可用预实验的方法选择适当的培养液。
(3)小牛血清:小牛血清对于维持培养细胞的生存和促进细胞增殖起着关键性作用。可选择多种不同批号的小牛血清进行小样分析。一旦确定某一厂家的某一批号小牛血清后,就保持应用至实验完成。
(4)胶原酶溶液:必须新鲜配制,贮存时间过长(即使是-20℃低温保存),也将影响消化效力,导致消化时间过长,细胞损伤增加。
(5)L-谷氨酰胺:几乎所有细胞对谷氨酰胺都有较高的要求,细胞需要谷氨酰胺合成核酸和蛋白质,在缺少谷氨酰胺时,细胞会因生长不良而死亡。谷氨酰胺在溶液中很不稳定,加有谷氨酰胺的培养液在4℃冰箱贮存两周以上时,就应重新加入原来量的谷氨酰胺。
(6)静置培养:原代细胞在消化分离后,置于CO2培养箱的头24~48h (必要时72h)内,应处于绝对静置状态,切忌不时地取出培养瓶观察生长状况,这将使原代分离细胞难以贴壁,更谈不上伸展和增殖,初学者尤应注意。不必担心培养液中的营养成分会消耗光,在细胞增殖之前对营养的要求并不大。原代培养初期仅加一薄层培养液的目的也在于有利于细胞贴壁伸展。
(7)消化时间:一般消化至肉眼尚可见微小组织颗粒即可,因为此时组织颗粒已经松散,略经吹打即成细胞团或单个细胞,过久的消化往往导致细胞损伤加重,细胞培养成活率降低。 (8)其他生长因子:经过以上处理,一般原代分离细胞培养均可以成功。对于少数特殊类型细胞也可以考虑加一些特殊的生长因子,如胰岛素能促使细胞摄取葡萄糖和氨基酸。另外,内毒素、EGF、FGF等均有促有丝分裂作用,但费用较高。
人人肾透明细胞腺癌细胞
人人高转移肺癌细胞
人人卵巢癌细胞A2780
人人T淋巴细胞白血病细胞
人人恶性黑色素瘤细胞
人表皮癌细胞(A431)
人人肺癌细胞
人人横纹肌瘤细胞
小鼠小鼠皮下结缔组织细胞
人人胚肾细胞
人人涎腺腺样囊性癌细胞
人人涎腺腺样囊性癌细胞
人人诞腺癌细胞系(Acc-M)
人人肾癌细胞系(ACHN)
人人胃腺癌细胞
人人子宫内膜腺癌细胞(AN3 CA)
小鼠小鼠巨噬细胞
人人卵巢癌细胞系(Anglne)
胰腺细胞AR42J
人人转移胰腺腺癌细胞
小鼠小鼠黑色素瘤细胞
鼠杂交瘤细胞(B6YH4)枝原体阳性
鼠鼠细胞系(B82)
美洲绒猴绒猴EBV转化的白细胞
小鼠小鼠胚胎成纤维细胞
人人乳腺癌细胞Bcap-37
人人肝癌细胞系(Bel-7402)
人人肝癌细胞
人人肝癌细胞
人人绒毛膜肿瘤细胞系(Bewo)
人人胃腺癌细胞(低分化)
鼠叙利亚仓鼠肾细胞系(BHK-21)
人膀胱癌细胞(BI U-87)
大鼠Buffalo大鼠肝细胞
猴猴肾细胞系(BSC-1)
人人胃癌BSG823
人人乳腺导管癌细胞
人人乳腺管癌细胞
人人原位胰腺腺癌细胞
小鼠小鼠乳腺肿瘤细胞
小鼠小鼠成肌细胞C2C12
人人子宫癌细胞C-33A
小鼠小鼠胚胎成纤维细胞
大鼠大鼠胶质瘤细胞
蚊子蚊子细胞(C6/36)
鼠鼠小脑细胞C8-D1A
人人宫颈癌肠转移细胞
人Burkitts淋巴瘤细胞系(CA46)
人人结肠腺癌细胞
人人食管癌细胞CaES-17
人人肾透明细胞癌皮肤转移细胞
人人肺腺癌 (胸水)
人人退行性癌细胞
人人乳突状卵巢腺癌细胞(Caov-3)
人人宫颈上皮细胞癌(Caski)
大鼠大鼠肝癌细胞
人人乳腺浸润性导管癌旁皮肤细胞
人人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞
人人胰腺癌细胞
人人EB病毒转化的B细胞
人人张氏肝细胞
中国仓鼠仓鼠肺细胞
人人肥大细胞白血病细胞CHMAS
中国仓鼠仓鼠卵巢细胞,二氢叶酸还原酶缺陷
中国仓鼠仓鼠卵巢细胞亚株
鲑鱼鲑鱼胚胎细胞CHSE
鱼草鱼肾脏细胞(CIK)
人人鼻咽癌细胞CNE(低分化)
人鼻咽癌细胞CNE2
人人卵巢癌细胞系(CoC1)
人CoC1细胞耐药亚株(CoC1/DDP)
人人结肠癌细胞
人人结肠腺癌细胞
非洲绿猴非洲绿猴SV40转化的肾细胞
非洲绿猴非洲绿猴SV40转化的肾细胞
猫猫肾细胞
中国仓鼠中国仓鼠卵巢细胞
非洲绿猴非洲绿猴肾细胞
人人结肠腺癌细胞
人人巨核细胞白血病细胞
人人成巨核细胞白血病细胞
人人结直肠腺癌上皮细胞
人人小细胞肺癌DMS153
鸡鸡淋巴瘤细胞
人人前列腺癌细胞
鼠鼠腹水瘤(EAC-E2G8)
牛牛胚气管细胞
人人食道癌细胞Eca-109
人人脐静脉内皮细胞系(ECV-304)(具有T24细胞特性)
小鼠小鼠淋巴瘤(EL-4)
鲤鱼鲤鱼上皮细胞EPC
人人卵巢透明细胞癌
人人腺癌细胞系(F56)
猫猫肾细胞
小鼠小鼠畸胎瘤细胞
人人咽鳞癌细胞
牙鲆细胞FG
人人肝细胞FL62891
小鼠小鼠骨髓瘤细胞
猴恒河猴胚肾细胞(FRhK-4)
鱼草鱼肾细胞系(GIK)
人上颌牙龈癌颈淋巴结转移癌GNM
鼠鼠成纤维细胞系(GR)
鼠BALB/C小鼠肝癌细胞系(H22)
鼠鼠肝癌细胞(H22-H8D8)
人人表皮肺癌细胞H292
人人脑神经胶质瘤细胞(H4)
鼠大鼠肝癌细胞系H4-ⅡE
人人T淋巴细胞系(H9)
大鼠大鼠心肌细胞
人人羊膜细胞
人人永生化表皮细胞(HaCAT)
人人口腔癌细胞HB
人人乳腺细胞HBL-100
大鼠大鼠肾小球系膜细胞EC (HBZY-1)
人人子宫鳞癌细胞(高分化)
人人乳腺癌细胞
人人胆管细胞型肝癌细胞
人人盲肠腺癌细胞(未分化)
人人结肠癌细胞
人人结直肠腺癌细胞
人人盲肠腺癌细胞HCT-8
人人子宫内膜腺癌细胞
人人子宫内膜腺癌细胞
人人二倍体细胞系(HEL)
人人宫颈癌细胞系(Hela)
人人宫颈癌细胞
人宫颈癌细胞HeLa-S3
人人肝癌细胞
人人肝癌细胞
人人喉表皮样癌细胞
人人喉癌细胞系(Hep-2)
人人肝癌细胞系(Hep-3B)
小鼠小鼠肝癌细胞
人 表达HBV病毒的人肝细胞HepG2.2.15
人人胚肺成纤维细胞
人人胃癌细胞(未分化)
人人小肠癌细胞系(HIC)
人肾小管上皮细胞株HK-2
人人二倍体细胞系(HL)
人早幼粒急性白血病细胞系(HL-60)
人人肝正常细胞HL-7702
人人B淋巴母细胞
人人卵巢癌细胞HO-8910
人人正常乳腺细胞
人人乳腺癌细胞
人男性正常龟头细胞系HS68
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