实验原理
小鼠三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗EGFR抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗EGFR抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的EGFR呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
笃玛生物试剂盒组成及试剂配制
1. 酶联板：一块（96孔）
2. 标准品（冻干品）：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为4,000 fmol/L，请先稀释至2,000 fmol/L，再做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释）后，分别稀释成2,000 fmol/L，1,000 fmol/L，500 fmol/L，250 fmol/L，125 fmol/L，62.5 fmol/L，31.2 fmol/L，样品稀释液直接作为标准浓度0 fmol/L，临用前15分钟内配制。如配制1,000 fmol/L标准品：取0.5ml （不要少于0.5ml ） 2,000 fmol/L的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液：1×20ml。
4. 检测稀释液A：1×10ml。
5. 检测稀释液B：1×10ml。
6. 检测溶液A：1×120μl（1:100）临用前以检测稀释液A 1:100稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（100μl/孔），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl检测溶液A加990μl检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。
7. 检测溶液B：1×120μl/瓶（1:100）临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。
8. 底物溶液：1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
11. 覆膜：5张
12. 使用说明书：1份小鼠三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒
小鼠三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒标本的采集及保存
1. 血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
注：以上标本置4℃保存应小于1周，-20℃或-80℃均应密封保存，-20℃不应超过1个月，-80℃不应超过2个月；标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。
笃玛生物实验操作步骤
实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。
4. 每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。
7. 依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。 在加终止液后立即进行检测。
注：小鼠三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒
1. 试剂准备：所有试剂都必须在使用前达到室温，使用后请立即按照说明书要求保存试剂。 实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。
2. 加样：加样或加试剂时，请注意在吸取标本 / 标准品，酶结合物或底物时，第一个孔与最后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的 “预孵育”时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间（包括标准品及所有样品）最好控制在10分钟内，如标本数量多，推荐使用多道移液器加样。
3. 孵育：为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜，以避免液体蒸发；洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。
4. 洗涤：洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，勿将滤纸直接放入反应孔中吸水，同时要消除板底残留的液体和手指印，避免影响最后的酶标仪读数。
5. 试剂配制：Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用，并使用相应的稀释液配制，不能混淆。请精确配置标准品及工作液，尽量不要微量配置（如吸取检测溶液A时，一次不要小于10μl），以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差；请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。
6. 反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化（比如，每隔10分钟），如颜色较深，请提前加入终止液终止反应，避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
7. 底物：底物请避光保存，在储存和温育时避免强光直接照射。
建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。
如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请最后乘以稀释倍数。
小鼠三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒洗板方法
1. 手工洗板方法：吸去（不可触及板壁）或甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内，浸泡1-2分钟，根据需要，重复此过程数次。
2. 自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
特异性
本试剂盒可同时检测重组或天然的人EGFR，且与其它相关蛋白无交叉反应。
计算
以标准物的浓度为纵坐标（对数坐标），OD值为横坐标（对数坐标），在对数坐标纸上绘出标准曲线。推荐使用专业制作曲线软件进行分析，如curve expert 1.3，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度，再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
检测范围：31.2 fmol/L - 2,000 fmol/L
最低检测限：7.8 fmol/L
供应产品信息小鼠三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒DMX0898小鼠骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0899小鼠抵抗素(Resistin)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0900小鼠催乳素(PRL)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0901小鼠促肾上腺皮质激素(ACTH)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0902小鼠促卵泡素(FSH)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0407小鼠缺血修饰白蛋白(IMA)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0468小鼠β内啡肽(β-EP)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0903小鼠N端前脑钠素(NT-proBNP)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0904小鼠前心钠肽(Pro-ANP)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0905小鼠大内皮素(Big ET)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0906小鼠内皮素1(ET-1)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0907小鼠降钙素(CT)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0908小鼠可溶性核因子κB受体活化因子配基(sRANKL)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0909小鼠促甲状腺素(TSH)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0910小鼠皮质醇(Cortisol)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0911小鼠雌二醇(E2)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0912小鼠脱氢表雄酮硫酸酯(DHEA-S)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0527小鼠孕激素/孕酮(PROG)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0913小鼠睾酮(T)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0914小鼠游离睾酮(F-TESTO)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0915小鼠雄烯二酮(ASD)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0916小鼠雌三醇(E3)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0917小鼠17羟孕酮(17-OHP)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0918小鼠三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0919小鼠甲状腺素(T4)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0920小鼠游离甲状腺素(FT4)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0921小鼠游离三碘甲状腺原氨酸(Free-T3)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0922小鼠新生甲状腺素(NN-T4)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0923小鼠胰岛素(INS)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0924小鼠C肽(C-Peptide)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0925小鼠绒毛膜促性腺激素(CG)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0926小鼠促黄体激素(LH)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0927小鼠抗中性粒/中心体抗体(ACA)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0928小鼠磷脂酰肌醇抗体IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0929小鼠解脲脲原体抗体(UU-Ab)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0338小鼠T细胞活化连接蛋白(LAT)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0930小鼠对氨基苯甲酸(PABA)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0931小鼠补体1抑制物抗体(C1INH)ELISA试剂盒 96T/48T
DMX0932小鼠毒性休克综合征毒素1(TSST-1)ELISA试剂盒 96T/48T
DMX0933小鼠心钠肽(ANP)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0492小鼠肿瘤标志物(CA724)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0934小鼠丙酮酸激酶(PK)ELISA试剂盒 96T/48T
DMX0935小鼠苯丙氨酸(LPA)ELISA试剂盒 96T/48T
DMX0936小鼠半乳糖6硫酸酯酶(Gal-6S)ELISA试剂盒 96T/48T
DMX0937小鼠β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)ELISA试剂盒 96T/48T
DMX0938小鼠β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA试剂盒 96T/48T
DMX0939小鼠β萘酚(β-naphthol)ELISA试剂盒 96T/48T
DMX0940小鼠β内酰胺酶抑制剂(BLI)ELISA试剂盒 96T/48T
DMX0941小鼠β甘露糖苷酶(β Manase)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0942小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0943小鼠β氨基己糖苷酶A(β-hexosaminidase A)ELISA试剂盒 96T/48T
DMX0944小鼠α半乳糖基抗体(Gal)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0945小鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0946小鼠α羟基丁酸脱氢酶(αHBDH)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0947小鼠α甘露糖苷酶(α Manase)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0948小鼠αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA试剂盒96T/48T
DMX0949小鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin 2(Eotaxin 2/CCL24)ELISA试剂盒 96T/48T
