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本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人ACE抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的人ACE会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人ACE抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人ACE抗体与结合在包被抗体上的人ACE结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,ACE浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中ACE的浓度。
本产品适用于体外定量检测人血清、血浆或其它相关生物液体中天然和重组ACE浓度
*: [96T/48T](打开包装后请及时检查所有物品是否齐全完整)
#: 一周内使用可存于4℃,需长时间存放或多次使用建议存于-20℃.
相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出!
人激活素A(ACVA)酶联免疫试剂盒
试验所需自备物品:
1. 酶标仪(450nm波长滤光片)
2. 高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL
3. 37℃恒温箱,双蒸水或去离子水
4. 吸水纸
检测准备工作:
1. 请提20分钟从冰箱中取出试剂盒,平衡至室温。
2. 将浓缩洗涤液用双蒸水稀释(1:25)。未用完的放回4℃。从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象,可用40℃水浴微加热使结晶完全溶解后再配制洗涤液(加热温度不要超过50℃,使用时洗涤液应为室温)。当日使用。
3. 标准品: 于10000×g离心1分钟,加入标准品&样品稀释液1.0mL至冻干标准品中,旋紧管盖,静置10分钟,上下颠倒数次,待其充分溶解后,用移液器将其轻轻混匀(浓度为50ng/mL)。然后根据需要进行倍比稀释(注:不要直接在反应孔中进行倍比稀释)。建议配制成以下浓度:50、25、12.5、6.25、3.125、1.563、0.781、0ng/mL,标准品&样品稀释液直接作为空白孔0ng/mL。如配制25ng/mL标准品:取0.5mL50ng/mL的上述标准品加入含有0.5mL标准品&样品稀释液的EP管中,混匀即可,其余浓度依此类推。
6th Edition, revised in June, 2014
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人激活素A(ACVA)酶联免疫试剂盒
4. 生物素化抗体工作液:实验计算当次实验所需用量(以100μL/孔计),实际配制时应多配制100-200μL。使用15分钟,以生物素化抗体稀释液稀释浓缩生物素化抗体(1:100)成工作浓度。当日使用。
5. 酶结合物工作液:实验计算当次实验所需用量(以100μL/孔计),实际配制时应多配制100-200μL。使用15分钟,以酶结合物稀释液稀释浓缩HRP酶结合物(1:100)成工作浓度。当日使用。
结果判断:
1. 每个标准品的OD值减去空白孔的OD值后作图,如设置复孔,则应取其平均值计算。以标准品的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,绘出标准曲线。亦可以OD值为横坐标,标准品的浓度为纵坐标,绘出标准曲线。
2. 推荐使用业的曲线制作软件,如curve expert 1.3或1.4,在软件界面既可根据样品OD值,由标准曲线查出相应的浓度,乘以稀释倍数;亦可将样品的OD值代入标准曲线的拟合方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
3. 若样品OD值高于标准曲线上限,应适当稀释后重测,计算浓度时应乘以稀释倍数。
人激活素A(ACVA)酶联免疫试剂盒
灵敏度、检测范围、特异性和重复性:
●灵敏度:小可测0.469ng/mL。
●检测范围:0.781–50ng/mL。
● 特异性:可检测重组或天然的人ACE,且与其它相关蛋白无交叉反应。
● 重复性:板内,板间变异系数均<10%。
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大鼠基质金属蛋白酶12(MMP-12)ELISA试剂盒供应商大鼠基质金属蛋白酶12(MMP-12)ELISA试剂盒供应商
产品:大鼠基质金属蛋白酶12(MMP-12)ELISA试剂盒供应商
英文名称:Rat MMP-12 (Matrix Metalloproteinase 12) ELISA Kit
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