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ELISA 检测的目的是为实验提供准确可靠的定量分析实验依据。为了保证实验数据的可靠性,在实验过程中必须坚持全面质量控制和全过程质量控制。在收集标本前都必须有一个完整的计划。齐一生物销售:021-6034 8496;181214 53965;173021 04490
注意事项:
◆ 每个标本量收集体积= 100ul × 检测种类,如要做复孔,标本量收集体积= 100ul × 检测种类×2 。
◆ 对于作某一个具体指标来说,最好先用一系列稀释度作一批标本测定,得出对实验有意义的一个稀释度(即测定剂量反应曲线),然后用一个最适稀释度测定即可。
◆ 收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存在4℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本,将标本及时分装后放在-20℃ 或-70℃ 条件下保存。避免反复冻融。标本 2 -8 ℃ 可保存48 小时.-20℃ 可保存1个月。 -70 度可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。
◆ 血清标本采集时,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以 HRP为标记的 ELISA 测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。
【大鼠胰淀素(Amylin)ELISA试剂盒厂家】◆ 为了保证尿液检测结果的准确性,必须正确收集尿液标本和保存。盛尿容器要清洁干燥。最好使用一次性的容器(如塑料尿杯),避免因用药并清洗不干净而造成的污染,影响检测结果。尿液标本必须新鲜,留取后,应及时检测或保存,以免细菌繁殖。因在室温中久置后(尤其是夏季)尿中磷酸盐等可析出结晶而干扰检测。
◆ 标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性 HRP,也会产生假阳性反应。保存过久可发生聚合在 ELISA中可使本底加深。
◆ 冻结标本融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠倒混和,不要在混匀器上强烈振荡。
◆ 混浊或有沉淀的标本应先离心或过滤,澄清后再检测。
◆ 反复冻融会使蛋白效价降低,所以待测标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。也可加入适当防腐剂。
◆ 如果您在实验中遇到任何特殊问题,敬请咨询 标本类型
ELISA常见的标本一般包括:
◆ 液体类标本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
◆ 培养细胞
◆ 组织标本
这些标本收集的时间、方法和保存都有一定的要求。
【大鼠胰淀素(Amylin)ELISA试剂盒厂家】标本的保存
一般说来,在 5 天内测定的标本可放置于 4℃,超过一周测定的需低温冻存。
对收集后当天进行检测的标本,储存在 4 ℃ 备用,如有特殊原因需要周期收集标本, 将标本及时分装后放在 -20 ℃ 或 -70 ℃ 条件下保存。避免反复冻融。 标本 2 -8 ℃ 可保存 48 小时,-20 ℃ 可保存 1 个月。-70 度可保存 6 个月。部分标本也可加入适当防腐剂,激素类标本需添加抑肽酶。标本的处理 可用作 ELISA 测定的标本十分广泛,体液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液)、细胞培养上清、细胞、组织等均可作标本以测定其中某种成份。有些标本可直接进行测定,有些则需经预处理。
◆ 血清:
室温血液自然凝固 10-20 分钟后,离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分)。收集上清。如有沉淀形成,应再次离心。
◆ 血浆:
应根据试剂盒的要求选择 EDTA 、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,加入 10 %( v/v )抗凝剂 ( 0.1M 柠檬酸钠或 1% heparin 或 2.0%EDTA.Na2) 混合 10-20 分钟后,离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分)。仔细收集上清如有沉淀形 成,应再次离心。
【大鼠胰淀素(Amylin)ELISA试剂盒厂家】◆ 尿液、胸腹水、脑脊液:
用无菌管收集。离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分)。仔细收集上清。如有沉淀形成,应再次离心。
◆ 细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分)。仔细收集上清。检测细胞内的 成份时,用 PBS ( PH7.2-7.4 )稀释细胞悬液,细胞浓度达到 100 万 /ml 左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
◆ 细胞:
检测细胞的成份时,对于贴壁细胞,去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。加入适量裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞10 秒后,细胞就会被裂解。对于悬浮细胞,离心收集细胞,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍.加入适量裂解液, 用枪吹打把细胞吹散。用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装然后再裂解。充分裂解后,10000-14000g离心3-5 分钟,取上
清,即可进行后续操作。
【大鼠胰淀素(Amylin)ELISA试剂盒厂家】◆ 组织标本:
切割标本后,称取重量。加入一定量的 PBS或组织蛋白萃取试剂,缓冲液中可加入蛋白酶抑制剂。用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分)。仔细收集上清置于 -20 度或 - 70 度保存,如有必要,可以将样品浓缩干燥。分装后一份待检测,其余冷冻备用。齐一生物销售:021-6034 8496;181214 53965;173021 04490
9001690 Rotor-Gene Q 2Plex HRM no PC CNY 【大鼠胰淀素(Amylin)ELISA试剂盒厂家】
9001680 Rotor-Gene Q 2Plex no PC CNY
133036 NeXtalStock Ammonium tartrate (200) CNY
239085 GelPilot 1 kb Ladder (100) Ready-to-use DNA marker, 600µl (100lanes), 9 fragments: 1000 – 10000 bp CNY
231222 QIAGEN PCR Cloning plus Kit (10) For 10 reactions: 2x Ligation Master Mix (50 ul), pDrive Cloning Vector (0.5 ug), distilled water (1.7 ml), QIAGEN EZ Competent Cells (10 tubes, 50 ul each), SOC medium (2 x 1.9 ml) CNY
9015314 Belts, Y-timing, v1 (2) CNY
133146 NeXtalStock ADA pH 7.0 (200) CNY
133017 NeXtalStock Ammonium iodide (200) CNY
1043367 QIAamp MinElute Virus Accessory Set CNY
950154 Wash Reagent (DXW) (650 ml) CNY
219000 miScript Target Protector CNY
218411 Human miScript Primer Assay Set VXX.X CNY
218200 Custom miScript Primer Assay (100) CNY
27115 QIAprep Spin Miniprep Columns (100) CNY
74034 RNeasy Plus Micro Kit (50) CNY
73404 RNeasy Plus Universal Tissue Mini Kit50 CNY
20912 Buffer QX1 Indikator (500 ml) 500 ml Solubilization and Binding Buffer (with pH indicator) CNY 【大鼠胰淀素(Amylin)ELISA试剂盒厂家】
19587 Extension Tubes (3ml) CNY
69989 Stainless Steel Beads 5 mm (200) Stainless Steel Beads, suitable for use with the TissueLyser system CNY
69965 TissueLyser Single-Bead Dispenser, 5mm CNY
19101 RNase A (17500 U) 2.5 ml (100 mg/ml; 7000 units/ml, solution) CNY
19053 Buffer P3 500 ml Neutralization Buffer CNY
19015 QIArack 1 rack for 12 x QIAGEN-tip 20, 8 x QIAGEN-tip 100, 6 x QIAGEN-tip 500 or HiSpeed Midi Tips, 4 x QIAGEN-tip 2500 or HiSpeed Maxi Tips, or 10 x QIAfilter Midi or Maxi Cartridges CNY
12965 QIAGEN Plasmid Plus Maxi Kit (100) QIAGEN Plasmid Plus Kits enable ultrafast, large-scale plasmid purification of pure plasmid DNA. The use of a vacuum manifold allows purification of up to 12 (Mega and Giga) or up to 24 (Midi and Maxi) samples in parallel with low hands-on needs. Low elution volumes yield highly concentrated plasmid DNA for direct use without ethanol precipitation. QIAGEN Plasmid Plus Kits also feature a novel wash buffer for endotoxin reduction. CNY
12262 QIAfilter Plasmid Maxi Kit (10) 10 QIAGEN-tip 500, Reagents, Buffers, 10 QIAfilter Maxi Cartridges CNY
12183 QIAGEN Plasmid Mega Kit (25) 25 QIAGEN-tip 2500, Reagents, Buffers CNY
133278 NeXtalStock SPG pH 4.0 (200) CNY
4502265 artus VZV RG PCR Kit (96) CE CNY
133263 NeXtalStock PCB pH 4.0 (200) CNY
990600 Lysis Plate, 96-well (5) CNY
990554 Reagent Trough (with Lid), 70 mL (10) ccc CNY
4502063 artus VZV LC PCR Kit (24) CE CNY
EK0779 hIL7-ELISA 人IL-7ELISA试剂盒 Human IL-7 ELISA Kit 96 tests 【大鼠胰淀素(Amylin)ELISA试剂盒厂家】
EK0799 hIL27-ELISA 人IL-27ELISA试剂盒 Human IL-27 ELISA Kit 96 tests
EK0807 hCSF1R-ELISA 人CSF1R/M-CSFRELISA试剂盒 Human CSF1R/M-CSFR ELISA Kit 96 tests
EK0816 hKal3-ELISA 人Kallikrein 3ELISA试剂盒 Human Kallikrein 3 ELISA Kit 96 tests
EK0829 hRANK-ELISA 人 Receptor Activator of NF-κB (RANK)ELISA试剂盒 Human Receptor Activator of NF-κB (RANK) ELISA Kit 96 tests
EK0850 hMPO-ELISA 人过氧化物酶ELISA试剂盒 Human Myeloperoxidase (MPO) ELISA Kit 96 tests
EK0859 hPAI1-ELISA 人PAI-1ELISA试剂盒 Human PAI-1 ELISA Kit 96 tests
EK0867 hDKK1-ELISA 人DKK-1ELISA试剂盒 Human DKK-1 ELISA Kit 96 tests
EK0873 hPECAM-ELISA 人PECAM-1/CD31ELISA试剂盒 Human PECAM-1/CD31 ELISA Kit 96 tests
EK0884 hBMP7-ELISA 人BMP-7ELISA试剂盒 Human BMP-7 ELISA Kit 96 tests
EK0895 hp53-ELISA 人p53 ELISA试剂盒 Human p53 ELISA Kit 96 tests
EK0904 hCEA-ELISA 人CEAELISA试剂盒 Human CEA ELISA Kit 96 tests
EK0906 hTLR2-ELISA 人TLR2ELISA试剂盒 Human TLR2 ELISA Kit 96 tests
EK0907 hTLR3-ELISA 人TLR3ELISA试剂盒 Human TLR3 ELISA Kit 96 tests
EK0928 hTF/F3-ELISA 人组织因子/F3ELISA试剂盒 Human Tissue factor/F3 ELISA Kit 96 tests
EK0309 mBDNF-ELISA 小鼠脑源性神经生长因子ELISA试剂盒 Mouse BDNF ELISA Kit 96 tests
EK0313 mBMP-2-ELISA 小鼠BMP-2ELISA试剂盒 Mouse BMP-2 ELISA Kit 96 tests 【大鼠胰淀素(Amylin)ELISA试剂盒厂家】
EK0326 mEGF-ELISA 小鼠表皮生长因子ELISA试剂盒 Mouse EGF ELISA Kit 96 tests
EK0333 mEPO-ELISA 小鼠促红细胞生成素ELISA试剂盒 Mouse EPO ELISA Kit 96 tests
EK0336 mFAS-ELISA 小鼠凋亡相关因子ELISA试剂盒 Mouse FAS ELISA Kit 96 tests
EK0351 mFN-ELISA 小鼠胚胎纤维连接蛋白ELISA试剂盒 Mouse Fibronectin ELISA Kit 96 tests
EK0361 mG-CSF-ELISA 小鼠粒细胞集落刺激因子ELISA试剂盒 Mouse G-CSF ELISA Kit 96 tests
EK0365 mGM-CSF-ELISA 小鼠粒细胞巨噬细胞刺激因子ELISA试剂盒 Mouse GM-CSF ELISA Kit 96 tests
EK0371 mICAM-1-ELISA 小鼠细胞间粘附分子ELISA试剂盒 Mouse ICAM-1 ELISA Kit 96 tests
EK0375 mIFN-γ-ELISA 小鼠IFN-γELISA试剂盒 Mouse IFN-γ ELISA Kit 96 tests
EK0378 mIGF-1-ELISA 小鼠IGF-1ELISA试剂盒 Mouse IGF-1 ELISA Kit 96 tests
EK0381 mIGF-2-ELISA 小鼠IGF-2 ELISA试剂盒 Mouse IGF-2 ELISA Kit 96 tests
EK0383 mIGFBP-1-ELISA 小鼠IGFBP-1ELISA试剂盒 Mouse IGFBP-1 ELISA Kit 96 tests
EK0387 mIGFBP-3-ELISA 小鼠IGFBP-3ELISA试剂盒 Mouse IGFBP-3 ELISA Kit 96 tests
EK0391 mIL-1α-ELISA 小鼠IL-1αELISA试剂盒 Mouse IL-1α ELISA Kit 96 tests
EK0394 mIL-1α-ELISA 小鼠IL-1αELISA试剂盒 Mouse IL-1α ELISA Kit 96 tests
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