一步法荧光定量耐热反转录PCR试剂盒

产品名称：ToneScript One Step SYBR qRT-PCR kit

英文名称：ToneScript One Step SYBR qRT-PCR kit

产品编号：TK08045

产品规格：50 µl反应× 100次

储存条件及有效期：试剂盒于-20℃避光保存，有效期12个月。

产品描述：

本试剂盒是采用SYBR Green I嵌合荧光法进行One Step qRT-PCR的专用试剂。使用本试剂盒进行qRT-PCR反应可在同一反应管内连续进行，操作简单，并能有效防止污染。本反应体系由于可以对扩增产物进行实时检测，大大提高了检测的灵敏度，并省略了PCR反应后电泳的步骤，非常适合微量RNA的检测。

产品特点：

本产品中使用了最适合于qRT-PCR的反转录酶ToneScript RTase和抗体修饰的具有高效扩增效率的Hot Start Taq Polymerase，能进行稳定的One Step qRT-PCR反应，可以快速、准确地对RNA病毒等微量RNA进行分析。本品可以在宽广的定量区域内得到良好的标准曲线，对靶基因进行准确定量检测，重复性好，可信度高。

准备材料：

实时荧光定量PCR仪、RNA模板、PCR引物、移液器枪头。

 一步法荧光定量耐热反转录PCR试剂盒注意事项：

1、根据不同的荧光定量PCR系统来决定ROX Reference Dye的使用。

2、当有多个样品进行反应时，应先配制各种试剂的混合液，然后再分装到每个反应管中，可使所取试剂体积准确，避免同一试剂多次吸取造成浪费，同时也减少每个样品之间的误差。

3、使用ToneScript One Step Enzyme Mix时应轻轻混匀，避免起泡，吸取应请短暂离心，将试剂收集到管底部，同时由于含有甘油，所以应缓慢吸取，并且枪头不宜插入液面过深，造成损失。

4、2×One Step SYBR qRT-PCR buffer溶解后要充分混合，使用Vortex等振荡完全溶解后使用。

5、本制品中使用的 Hot Start Taq Polymerase是用Taq抗体修饰的 Hot Start 高效DNA聚合酶，与化学修饰型的 Hot Start DNA聚合酶相比，不需要PCR反应前的95℃，5-10 min的预变性，高温处理时间过长，会使酶的活性下降，其PCR扩增效率和定量准确度都会受到影响。

6、本产品只能用基因特异反转录引物，不能使用Random Primer和Oligo dT Primer等进行反转录反应。

 一步法荧光定量耐热反转录PCR试剂盒RNA模板制备注意事项

RNA模板可以采用总RNA或mRNA。本试剂盒将RNA反转录成cDNA，然后对cDNA进行扩增，RNA的纯度会影响cDNA的合成量，制备RNA的关键是要抑制细胞中和环境中的RNase，防止RNA降解。因此，在实验中戴一次性手套，使用RNA专用实验台，实验中避免讲话等。相关实验耗材应用0.1%DEPC（焦碳酸二乙酯）水溶液在37℃处理12 h，并高压灭菌30 min后使用。

同科生物简介：成立于2007年，是一家集研发、生产、销售和技术服务于一体专注于生命医学和生物技术领域的高科技企业。主营业务有科研产品、诊断试剂、分子诊断和技术服务等，主要服务于科研机构、大专院校、医院和工业等客户。

生产科研：同科生物搭建多个研发与合作技术平台（博士后实践基地、院士工作站、同济大学人才培养与产学研合作基地及生物研究中心等），为技术创新提供了坚实的基础保障。拥有三类体外试剂生产中心、仪器生产中心、研发质检实验室等、厂房和实验面积达8000多平米，仪器设备设施先进齐全（包括定量PCR仪、生物安全柜、核酸蛋白测定仪、高压细胞破碎仪、FPLC等系列高端精密仪器设备）。

研发团队：同科拥有一支由中科院院士为顾问，国家千人为首席科学家，以博士硕士为主体的高效的国际化研发团队。研发人员专业涵盖生物化学、分子生物学、临床医学、免疫学、药物制剂、生物技术、遗传学、微生物学、生物工程领域，关联性较大，专业结构合理，且形成互补，在重大项目及关键技术上具备卓越的攻关能力。

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